λ噬菌體有極強的侵染能力,能在細菌中快速進行DNA復制,產生子代噬菌體,最終導致細菌破裂(稱為溶菌狀態(tài));或者整合到細菌基因組中潛伏起來,不產生子代噬菌體(稱為溶原狀態(tài)).在轉基因技術中常用λ噬菌體構建基因克隆載體,使其在受體細菌中大量擴增外源DNA,以備研究使用.相關操作如圖所示,請回答:
(1)在構建基因克隆載體時,可被噬菌體蛋白質包裝的DNA長度約為36~51kb,則經人工改造的λgt10載體可插入的外源DNA的最大長度為7.6kb7.6kbkb.為獲得較大的插入能力,可刪除λ噬菌體DNA組成中的中部(含控制溶原生長)中部(含控制溶原生長)序列以縮短其長度.
(2)構建基因克隆載體時,需用到的酶是限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶.λ噬菌體DNA上通常沒有適合的標記基因,因此人工改造時需加裝適合的標記基因,如圖λgt10載體中的imm434基因,該基因編碼一種阻止λ噬菌體進入溶菌狀態(tài)的阻遏物.外源DNA的插入位置應位于imm434基因之中之中(之中/之外),使經侵染培養(yǎng)后的受體菌處于溶菌溶菌狀態(tài),表明已成功導入目的基因.
(3)合成噬菌體所需的小分子原料主要是氨基酸和脫氧核苷酸氨基酸和脫氧核苷酸.分離純化噬菌體重組DNA時,將經培養(yǎng)10小時左右的大腸桿菌=噬菌體的培養(yǎng)液超速離心,從上清液上清液(上清液、沉淀物)獲得噬菌體.
【考點】噬菌體侵染細菌實驗.
【答案】7.6kb;中部(含控制溶原生長);限制酶和DNA連接酶;之中;溶菌;氨基酸和脫氧核苷酸;上清液
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:49引用:4難度:0.1
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