為研究30Kc6蛋白對(duì)家蠶細(xì)胞凋亡的抑制作用，請(qǐng)根據(jù)以下提供材料與用具，以家蠶細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)目變化和DNA碎片化為測(cè)定指標(biāo)，完善實(shí)驗(yàn)思路，預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果并進(jìn)行分析與討論。
材料與用具：家蠶細(xì)胞懸液、一定濃度的 H₂O₂溶液、30Kc6蛋白溶液、培養(yǎng)液、培養(yǎng)瓶、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板、顯微鏡、DNA碎片化測(cè)定試劑盒等。
（要求與說(shuō)明：細(xì)胞計(jì)數(shù)的具體操作過(guò)程和DNA碎片化測(cè)定試劑盒的具體操作不做要求，不考慮加入溶液對(duì)體積的影響，實(shí)驗(yàn)條件適宜）
回答下列問(wèn)題：
（一）實(shí)驗(yàn)思路：
①取家蠶細(xì)胞懸液加入到含培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板在顯微鏡下計(jì)數(shù)，用DNA碎片化測(cè)定試劑盒檢測(cè)DNA碎片化情況，并記錄。
②將各瓶細(xì)胞懸液隨機(jī)均分為A、B、C、D4組，A、B組用適量且等量的一定濃度的H₂O₂溶液處理，C、D組不作處理。
③

每隔一段時(shí)間，分別去上述4組培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)物，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板在顯微鏡下計(jì)數(shù)，用DNA碎片化測(cè)定試劑盒檢測(cè)DNA碎片化情況，并記錄

每隔一段時(shí)間，分別去上述4組培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)物，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板在顯微鏡下計(jì)數(shù)，用DNA碎片化測(cè)定試劑盒檢測(cè)DNA碎片化情況，并記錄

。
④

當(dāng)細(xì)胞數(shù)量和DNA碎片化程度達(dá)到一定值時(shí)，向B、C組分別加入等量且適量的30Kc6蛋白溶液

當(dāng)細(xì)胞數(shù)量和DNA碎片化程度達(dá)到一定值時(shí)，向B、C組分別加入等量且適量的30Kc6蛋白溶液

。
⑤重復(fù)步驟 3，統(tǒng)計(jì)并分析所得的數(shù)據(jù)。
（二）預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果（以坐標(biāo)曲線圖形式表示DNA碎片化程度變化情況，并標(biāo)出加入藥物的時(shí)間點(diǎn)）：

。
（三）分析討論
①細(xì)胞凋亡過(guò)程除了DNA碎片化外，同時(shí)還伴隨著線粒體的破裂現(xiàn)象，這些現(xiàn)象都是基因

選擇性表達(dá)

選擇性表達(dá)

的結(jié)果。
②實(shí)驗(yàn)用H₂O₂需要控制特定濃度的原因是

H₂O₂引起細(xì)胞凋亡的作用效應(yīng)與濃度有關(guān)

H₂O₂引起細(xì)胞凋亡的作用效應(yīng)與濃度有關(guān)

，若想建立細(xì)胞凋亡模型除了要考慮H₂O₂濃度外，還需要考慮

H₂O₂作用時(shí)間

H₂O₂作用時(shí)間

。為獲得這兩個(gè)因素的最佳組合需要設(shè)計(jì)怎樣的實(shí)驗(yàn)方案？

設(shè)置不同濃度以及每個(gè)濃度的不同作用時(shí)間處理，觀察各組細(xì)胞的細(xì)胞凋亡率

設(shè)置不同濃度以及每個(gè)濃度的不同作用時(shí)間處理，觀察各組細(xì)胞的細(xì)胞凋亡率

。（簡(jiǎn)要方案說(shuō)明）