產(chǎn)脂肪酶酵母可用于含油廢水處理。為篩選產(chǎn)脂肪酶酵母菌株，科研人員開(kāi)展了相關(guān)研究。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）常規(guī)微生物實(shí)驗(yàn)中，下列物品及其滅菌方法錯(cuò)誤的是
③④
③④
（填編號(hào)）。
| 編號(hào) |
① |
② |
③ |
④ |
| 物品 |
培養(yǎng)基 |
接種環(huán) |
培養(yǎng)皿 |
涂布器 |
| 滅菌方法 |
高壓蒸汽 |
火焰灼燒 |
酒精擦拭 |
臭氧 |
（2）稱取1.0g某土壤樣品，轉(zhuǎn)入99mL無(wú)菌水中，制備成菌懸液，經(jīng)
梯度稀釋
梯度稀釋
后，獲得細(xì)胞密度不同的菌懸液。甲、乙兩位同學(xué)分別取菌懸液涂布在固體培養(yǎng)基上，在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果：甲同學(xué)涂布了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是110、140和149，取平均值133。乙同學(xué)涂布了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是27、169和176，取平均值124。有人認(rèn)為這兩位同學(xué)的結(jié)果中，乙同學(xué)的結(jié)果可信度低，其原因是：
乙同學(xué)的結(jié)果中，1個(gè)平板的計(jì)數(shù)與另2個(gè)相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差
乙同學(xué)的結(jié)果中，1個(gè)平板的計(jì)數(shù)與另2個(gè)相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差
。
（3）為了進(jìn)一步提高酵母菌產(chǎn)酶能力，對(duì)分離所得的菌株，采用射線輻照進(jìn)行誘變育種。將輻照處理后的酵母菌涂布在以
脂肪（或油脂）
脂肪（或油脂）
為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，按照菌落直徑大小進(jìn)行初篩，選擇直徑
較大
較大
的菌落，純化后獲得相應(yīng)突變菌株。
（4）在脂肪酶的分離過(guò)程中采用凝膠色譜法，此方法是根據(jù)
相對(duì)分子質(zhì)量的大小
相對(duì)分子質(zhì)量的大小
分離蛋白質(zhì)的有效方法；也采用聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè)其純度，通常會(huì)在凝膠中添加SDS，SDS的作用是
消除蛋白質(zhì)所帶凈電荷對(duì)遷移率的影響，使蛋白質(zhì)發(fā)生變性
消除蛋白質(zhì)所帶凈電荷對(duì)遷移率的影響，使蛋白質(zhì)發(fā)生變性
。
（5）在制備該酶的固定化酶時(shí)，一般不宜采用包埋法，原因是
酶分子體積，容易從包埋材料中漏出
酶分子體積，容易從包埋材料中漏出
（答出1點(diǎn)即可）。
