新冠病毒（SARS-CoV-2）的重組蛋白疫苗、核酸疫苗（包括DNA疫苗和RNA疫苗）等疫苗都在研發(fā)當(dāng)中。下圖為其中一種疫苗的研發(fā)思路；圖中①～⑦表示過(guò)程，B處箭頭表示NcoⅠ、SphⅠ、NheⅠ、BamHⅠ的酶切位點(diǎn)（四種酶的識(shí)別序列詳見(jiàn)表），標(biāo)記基因SUC2控制合成蔗糖酶，使P型酵母菌能利用培養(yǎng)基中的蔗糖生存。

限制酶	NcoⅠ	SphⅠ	NheⅠ	BamHⅠ
識(shí)別序列和切割位點(diǎn)	C↓CATGG	GCATG↓C	G↓GATCC	G↓CTAGC

（1）圖中①過(guò)程需要使用

逆轉(zhuǎn)錄（酶）

逆轉(zhuǎn)錄（酶）

酶先得到cDNA，再使用

PCR

PCR

技術(shù)擴(kuò)增得到s蛋白基因。
（2）為使③過(guò)程順利進(jìn)行，需先使用限制酶

NheⅠ和BamHⅠ

NheⅠ和BamHⅠ

切割質(zhì)粒B，再選用兩種限制酶對(duì)新冠病毒的S蛋白基因進(jìn)行切割的目的是

防止 S 蛋白基因自身環(huán)化、防止 S 蛋白基因與運(yùn)載體反向連接、防止運(yùn)載體自身環(huán)化

防止 S 蛋白基因自身環(huán)化、防止 S 蛋白基因與運(yùn)載體反向連接、防止運(yùn)載體自身環(huán)化

（答出1點(diǎn)即可）。
（3）S蛋白基因整合到受體細(xì)胞基因組上，最終能否翻譯出S蛋白至關(guān)重要，因此需要進(jìn)行蛋白質(zhì)的檢測(cè)，從受體細(xì)胞中提取

蛋白質(zhì)

蛋白質(zhì)

后，然后利用相應(yīng)的

抗體

抗體

進(jìn)行檢測(cè)。
（4）為檢驗(yàn)疫苗的效果，常常將重組疫苗注入志愿者體內(nèi)，參加臨床試驗(yàn)的志愿者需要滿足的條件之一是

無(wú)

無(wú)

（ 選填“有”或“無(wú)”） SARS-CoV-2感染史。重組疫苗注入志愿者體內(nèi)后，S蛋白基因指導(dǎo)合成的S蛋白作為抗原，刺激機(jī)體產(chǎn)生能與之相結(jié)合的抗體，

抗體的分泌量

抗體的分泌量

可作為檢測(cè)疫苗對(duì)志愿者免疫效果的指標(biāo)。