微生物的培養(yǎng)、分離和計(jì)數(shù)是許多微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本要求,請回答下列與微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問題:
(1)培養(yǎng)、分離微生物需要培養(yǎng)基,配制培養(yǎng)基的步驟是計(jì)算→
稱量
稱量
→溶化→滅菌
滅菌
→倒平板,溶化后的培養(yǎng)基需冷卻至 50
50
℃左右時(shí)才倒平板。
(2)測定微生物數(shù)量可以用顯微鏡直接計(jì)數(shù),該方法不能區(qū)分死菌與活菌,統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)常用 稀釋涂布平板
稀釋涂布平板
法,該方法的接種工具是 涂布器
涂布器
,該方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少,原因是 當(dāng)相鄰兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上只能形成一個(gè)菌落
當(dāng)相鄰兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上只能形成一個(gè)菌落
。在統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)時(shí)為了證明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染需設(shè)置對照,具體做法是 將一個(gè)(不接種的)空白培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間,若空白培養(yǎng)基不出現(xiàn)菌落就說明培養(yǎng)基沒被污染
將一個(gè)(不接種的)空白培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間,若空白培養(yǎng)基不出現(xiàn)菌落就說明培養(yǎng)基沒被污染
,為避免結(jié)果的偶然性,使結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠的辦法是 每個(gè)稀釋度的菌液接種3個(gè)平板,取3個(gè)平板的平均菌落數(shù)
每個(gè)稀釋度的菌液接種3個(gè)平板,取3個(gè)平板的平均菌落數(shù)
,平板中菌落數(shù)量太少、太多都不合適,平板中合適的菌落數(shù)應(yīng)該是 30~300
30~300
個(gè)。