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草甘膦是一種非選擇性除草劑,殺死雜草的同時也殺死農(nóng)作物。它與植物體內(nèi)的PEP(磷酸烯醇式丙酮酸)結(jié)構(gòu)相似,可與PEP競爭結(jié)合EPSP合酶,阻止PEP轉(zhuǎn)化,影響植物細胞正常代謝而導致植物死亡。我國科學家從草甘膦施用土壤中的微生物體內(nèi)獲取草甘膦抗性基因GR29,并將其導入大豆體細胞中獲得轉(zhuǎn)基因抗草甘膦大豆,如圖所示?;卮鹣铝袉栴}:
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(1)圖中的GR29基因稱為
目的基因
目的基因
,通過PCR技術(shù)可在總DNA中專一性的擴增出GR29基因,原因是
PCR過程中使用的引物能與GR29基因的cDNA特異性結(jié)合
PCR過程中使用的引物能與GR29基因的cDNA特異性結(jié)合

(2)圖中將GR29基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上,原因是農(nóng)桿菌能將Ti質(zhì)粒上的T-DNA分子轉(zhuǎn)移到宿主細胞并整合到宿主細胞的
染色體DNA
染色體DNA
上。構(gòu)建的重組Ti質(zhì)粒中除圖示元件外,還必須具有啟動子和終止子,其中啟動子的作用是
啟動子是RNA聚合酶識別與結(jié)合的部位,它能驅(qū)動目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA
啟動子是RNA聚合酶識別與結(jié)合的部位,它能驅(qū)動目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA

(3)圖中的兩次篩選中,其中“篩選1”中,需在農(nóng)桿菌的培養(yǎng)基中添加
四環(huán)素
四環(huán)素
,才能篩選出含重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌。在“篩選2”中,為檢測GR29基因能否翻譯出相應蛋白可采用的方法是
抗原—抗體雜交技術(shù)
抗原—抗體雜交技術(shù)
。
(4)為獲得草甘膦抗性更強的轉(zhuǎn)基因大豆,請嘗試對上述轉(zhuǎn)基因大豆培育過程進行改進,寫出你的改進措施:
用添加草甘膦的培養(yǎng)基進行篩選,并可逐步增加濃度
用添加草甘膦的培養(yǎng)基進行篩選,并可逐步增加濃度
。

【答案】目的基因;PCR過程中使用的引物能與GR29基因的cDNA特異性結(jié)合;染色體DNA;啟動子是RNA聚合酶識別與結(jié)合的部位,它能驅(qū)動目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA;四環(huán)素;抗原—抗體雜交技術(shù);用添加草甘膦的培養(yǎng)基進行篩選,并可逐步增加濃度
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:2引用:1難度:0.7
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    發(fā)布:2024/12/20 5:0:2組卷:35引用:5難度:0.6
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    (1)獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應用的生物技術(shù)有
     
    (答出2項)等。
    (2)為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒,應該選擇
     
    (填酶)切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入
     
    (填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”)對目的基因進行篩選。
    (3)培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程
     
    (填序號)。過程②③采用的方法是
     
    。
    (4)⑤過程需要用到
     
    等植物激素,在誘導愈傷組織分化成幼苗的過程中,這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化,原因是
     

    發(fā)布:2024/12/20 2:30:1組卷:16引用:5難度:0.5
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    限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ
    識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG
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    發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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