人血清白蛋白(HSA)具有重要的醫(yī)用價值,只能從人血漿中制備。圖一是以基因工程技術(shù)獲取重組HSA的兩條途徑,其中報告基因表達(dá)的產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。圖二為相關(guān)限制酶的識別序列和切割位點,以及HAS基因兩側(cè)的核苷酸序列。據(jù)圖回答下列問題:
(1)在構(gòu)建基因表達(dá)載體時,我們常常用不同的限制酶去切割目的基因和運載體來獲得不同的黏性末端,原因是防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化和反向連接防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化和反向連接。依據(jù)圖一和圖二分析,在構(gòu)建基因表達(dá)載體時下列敘述錯誤的是CC。
A.應(yīng)該使用酶B和酶C獲取HSA基因
B.應(yīng)該使用酶A和酶B切割Ti質(zhì)粒
C.成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒含1個酶A的識別位點
D.成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒用酶C處理將得到2個DNA片段
(2)PCR技術(shù)應(yīng)用的原理是DNA(雙鏈)復(fù)制DNA(雙鏈)復(fù)制,在利用該技術(shù)獲取目的基因的過程中,以從生物材料中提取的DNA作為模板,利用引物引物尋找HSA基因的位置并進(jìn)行擴(kuò)增。
(3)圖一過程①中需將植物細(xì)胞與農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng),旨在讓T-DNAT-DNA整合到植物細(xì)胞染色體DNA上;除盡農(nóng)桿菌后,還須轉(zhuǎn)接到含無色物質(zhì)K無色物質(zhì)K的培養(yǎng)基上篩選出轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞。
(4)圖一③過程中將目的基因?qū)刖d羊受體細(xì)胞,采用最多,也是最為有效的方法是顯微注射技術(shù)顯微注射技術(shù)。
(5)為檢測HSA基因的表達(dá)情況,可提取受體細(xì)胞的蛋白質(zhì)蛋白質(zhì),用抗血清白蛋白的抗體進(jìn)行雜交實驗。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化和反向連接;C;DNA(雙鏈)復(fù)制;引物;農(nóng)桿菌;T-DNA;無色物質(zhì)K;顯微注射技術(shù);蛋白質(zhì)
【解答】
【點評】
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3.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
(2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
(3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
(4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
(5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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