7歲的哈桑患有一種罕見(jiàn)皮膚疾病，他的皮膚非常脆弱，輕微摩擦就會(huì)導(dǎo)致皮膚破損，繼而感染各種病原微生物。醫(yī)生檢測(cè)發(fā)現(xiàn)哈桑的LAMB3基因有2個(gè)堿基對(duì)錯(cuò)誤，導(dǎo)致無(wú)法表達(dá)正常的層粘連蛋白。研究團(tuán)隊(duì)對(duì)哈桑進(jìn)行了基因治療，取下哈桑的一小塊皮膚，在體外大量培養(yǎng)。然后利用逆轉(zhuǎn)錄病毒載體將正常的LAMB3基因插入到細(xì)胞的基因組內(nèi)，篩選出成功導(dǎo)入目的基因的細(xì)胞后，繼續(xù)培養(yǎng)這些細(xì)胞，形成若干塊單層“人造皮膚”，對(duì)哈桑進(jìn)行皮膚移植，最后哈桑終于過(guò)上正常人的生活。

（1）哈桑經(jīng)常感染各種病原微生物的原因是

皮膚是人體的第一道防線，可阻擋病原體入侵機(jī)體，若被破壞則各種病原微生物容易入侵人體

皮膚是人體的第一道防線，可阻擋病原體入侵機(jī)體，若被破壞則各種病原微生物容易入侵人體

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（2）圖中①表示

逆轉(zhuǎn)錄

逆轉(zhuǎn)錄

過(guò)程。過(guò)程②將gag、pol、envu等分離后需構(gòu)建重組表達(dá)載體，并將其導(dǎo)入小鼠胚胎細(xì)胞。過(guò)程②④中用到的工具酶分別是

限制酶、DNA連接酶

限制酶、DNA連接酶

，過(guò)程⑤常用的導(dǎo)入方法是

顯微注射技術(shù)

顯微注射技術(shù)

。
（3）天然的逆轉(zhuǎn)錄病毒RNA上有3組序列，A序列含有調(diào)節(jié)基因和啟動(dòng)子，調(diào)控病毒RNA的轉(zhuǎn)移及表達(dá)；B序列編碼逆轉(zhuǎn)錄酶、外殼蛋白等病毒蛋白質(zhì)；C序列是包裝信號(hào)序列，能被病毒蛋白識(shí)別，引發(fā)病毒的組裝。操作②中的保留的LTR屬于

A

A

序列。過(guò)程⑤中導(dǎo)入病毒的gag、pol、env序列的目的是

合成組裝病毒的蛋白質(zhì)

合成組裝病毒的蛋白質(zhì)

。這種逆轉(zhuǎn)錄病毒載體作為一種基因表達(dá)載體，其優(yōu)點(diǎn)是

能將目的基因整合到受體細(xì)胞染色體中，使得目的基因能夠穩(wěn)定存在，并能表達(dá)和遺傳給子代細(xì)胞

能將目的基因整合到受體細(xì)胞染色體中，使得目的基因能夠穩(wěn)定存在，并能表達(dá)和遺傳給子代細(xì)胞

。
（4）基因治療的最大難度是要充分了解

基因調(diào)控機(jī)制和疾病的分子機(jī)理

基因調(diào)控機(jī)制和疾病的分子機(jī)理

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