如圖所示為A、B、C三種質粒和一個含目的基因D的DNA片段示意圖。圖中Ap為氨芐青霉素抗性基因,Tc為四環(huán)素抗性基因,lacZ為藍色顯色基因,EcoRⅠ、PvuⅠ為兩種限制酶,質粒上限制酶括號內的數(shù)字表示限制酶切割位點與復制原點的距離。請回答:
(1)據(jù)圖分析質粒A、C一般不能作為運載體的理由分別是(質粒A)缺少標記基因、(質粒C)復制原點會被限制酶切割(質粒A)缺少標記基因、(質粒C)復制原點會被限制酶切割。若要獲取目的基因,應該選用PvuIPvuI酶切割。
(2)將圖中的目的基因與質粒B進行重組。在基因工程的操作過程中,需要檢查目的基因是否重組到質粒中,應使用EcoRIEcoRI酶切重組質粒,完全酶切后,進行電泳檢測。若電泳圖譜中出現(xiàn)長度為1.1kb和5.6kb,或者3.13.1kb和3.63.6kb的片段,則可判斷該重組質粒已與目的基因重組成功(重組質粒上目的基因的插入位點與EcoRⅠ的識別位點之間的堿基對忽略不計)。
(3)若選擇自身不含lacZ基因并對抗生素敏感的大腸桿菌作為受體細胞,則如何篩選成功導入重組質粒的受體細胞?在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)經過導入處理的大腸桿菌,若能形成白色菌落的即為導入重組質粒的大腸桿菌在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)經過導入處理的大腸桿菌,若能形成白色菌落的即為導入重組質粒的大腸桿菌。目的基因能在大腸桿菌細胞內表達出相同的蛋白質,其遺傳學基礎是自然界的生物共用一套密碼子自然界的生物共用一套密碼子。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】(質粒A)缺少標記基因、(質粒C)復制原點會被限制酶切割;PvuI;EcoRI;3.1;3.6;在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)經過導入處理的大腸桿菌,若能形成白色菌落的即為導入重組質粒的大腸桿菌;自然界的生物共用一套密碼子
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:28引用:4難度:0.6
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1.下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是( )
A.DNA連接酶具有特異性,只能連接同一種限制性核酸內切酶切割形成的黏性末端 B.若能在植物細胞中檢測到相應的目的基因,則說明基因工程項目獲得成功 C.蛋白質工程需構建基因表達載體,改造后的蛋白質的性狀可遺傳給后代 D.將抗蟲基因整合到某植物的線粒體DNA中,可通過花粉傳播,從而引起基因污染 發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7 -
2.下列有關基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>
A.質粒上標記基因的作用是便于重組DNA分子的篩選 B.目的基因必須整合到受體細胞的DNA中才能復制 C.構建表達載體時需要在目的基因前加上起始密碼子 D.誘變育種和基因工程的原理相同 發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7 -
3.幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內,可增強其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
(2)生物體細胞內的DNA復制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
(3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
(4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
(5)若獲得的轉基因植株(幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6