黃曲霉毒素主要是由黃曲霉和寄生曲霉等多種真菌產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物，包括AFB₁、AFB₂、AFG₁等多種衍生物。黃曲霉毒素的毒性強(qiáng)，具有抑制免疫、誘導(dǎo)突變和致癌的作用，香豆素是黃曲霉毒素的結(jié)構(gòu)類似物。黃曲霉毒素的生物去除法是利用微生物分泌的酶降解黃曲霉毒素，產(chǎn)生低毒或無(wú)毒的降解產(chǎn)物。研究人員為篩選高效降解黃曲霉毒素的菌株，開展了相關(guān)的研究。回答下列問題：
（1）配制的富集培養(yǎng)基和初篩平板培養(yǎng)基，常用

高壓蒸汽滅菌

高壓蒸汽滅菌

法進(jìn)行滅菌。富集培養(yǎng)基的成分：香豆素0.1%、（NH₄）₂SO₄0.5%、NaCl0.85%、pH7.0；初篩平板培養(yǎng)基的成分：香豆素0.1%、（NH₄）₂SO₄0.5%、KH₂PO₄0.25%、MgSO₄0.1%、Na₂HPO₄?12H₂O 0.05%、CaCl₂ 0.01%、瓊脂2%、pH6.5。香豆素可用于篩選目的菌的原因是

香豆素的化學(xué)結(jié)構(gòu)與黃曲霉毒素的類似，作為唯一碳源可使目的菌能夠生長(zhǎng)而其他微生物生長(zhǎng)受到抑制

香豆素的化學(xué)結(jié)構(gòu)與黃曲霉毒素的類似，作為唯一碳源可使目的菌能夠生長(zhǎng)而其他微生物生長(zhǎng)受到抑制

。初篩平板培養(yǎng)基中無(wú)機(jī)物的主要作用是

提供無(wú)機(jī)鹽和維持培養(yǎng)基的pH穩(wěn)定

提供無(wú)機(jī)鹽和維持培養(yǎng)基的pH穩(wěn)定

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（2）從霉?fàn)€的花生殼、動(dòng)物糞便中取樣，稀釋后將菌懸液加入到富集培養(yǎng)基中，適宜條件下富集培養(yǎng)三次。將富集培養(yǎng)的菌液用

平板劃線法或稀釋涂布平板

平板劃線法或稀釋涂布平板

法接種到初篩平板培養(yǎng)基上，適宜條件下培養(yǎng)后，挑選

單個(gè)菌落直徑較大

單個(gè)菌落直徑較大

的菌體進(jìn)行純化培養(yǎng)。
（3）經(jīng)多輪篩選后獲得H菌株。搖瓶培養(yǎng)H菌株一段時(shí)間后取5mL發(fā)酵液進(jìn)行離心，取950μL離心上清液加入5μL一定濃度的AFB₁液，控制AFB，的終濃度1μg/mL。反應(yīng)24h后經(jīng)萃取、溶解、過(guò)濾后檢測(cè)殘余AFB₁的含量。該實(shí)驗(yàn)還需要在

滅菌的發(fā)酵離心上清液

滅菌的發(fā)酵離心上清液

中加入等量的AFB₁液作為空白對(duì)照。該步驟用于檢測(cè)

H菌株分泌的黃曲霉毒素降解酶的活力

H菌株分泌的黃曲霉毒素降解酶的活力

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