如圖是A基因的部分片段和載體的部分結(jié)構(gòu)，科研人員欲將A基因的啟動子連接在圖示載體中，進而使載體上的熒光蛋白基因得到表達。圖中標(biāo)記了A基因的部分片段、載體部分結(jié)構(gòu)中的限制酶酶切位點及五種限制酶的識別序列和切割位點，回答下列問題：
（1）A基因部分片段中R、F表示擴增啟動子所用的 引物引物，其作用是 使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。
（2）A基因的轉(zhuǎn)錄方向為 從左向右從左向右（填“從左向右”或“從右向左”），熒光蛋白基因的轉(zhuǎn)錄方向為 從右向左從右向左（填“從左向右”或“從右向左”），因此將A基因的啟動子連接到載體之前應(yīng)在F的 5'5'（填“3'”或“5'”）端連接五種酶中 SalⅠSalⅠ酶的識別序列，不選擇連接Xho I酶的理由是 用XhoⅠ切割A(yù)基因啟動子獲得黏性末端時會破壞A基因的啟動子用XhoⅠ切割A(yù)基因啟動子獲得黏性末端時會破壞A基因的啟動子。
（3）為完成科研人員的設(shè)想，除需使用F處添加的序列所對應(yīng)的酶外，構(gòu)建和擴增基因表達載體的過程還需用到 55種酶，分別是 EcoRⅠ、MunⅠ、XhoⅠ、TaqDNA聚合酶（耐高溫的DNA聚合酶）、DNA連接酶EcoRⅠ、MunⅠ、XhoⅠ、TaqDNA聚合酶（耐高溫的DNA聚合酶）、DNA連接酶。
【考點】基因工程的操作過程綜合；DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】引物；使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸；從左向右；從右向左；5'；SalⅠ；用XhoⅠ切割A(yù)基因啟動子獲得黏性末端時會破壞A基因的啟動子；5；EcoRⅠ、MunⅠ、XhoⅠ、TaqDNA聚合酶（耐高溫的DNA聚合酶）、DNA連接酶
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：12引用：2難度：0.7
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（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
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發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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