人參是一種名費(fèi)藥材，具有良好的滋補(bǔ)作用?？诜８蓴_素在慢性乙肝、丙肝及部分腫瘤的治療中有一定療效。如圖為科研人員制備能合成干擾素的人參愈傷組織細(xì)胞的流程，①～③表示相關(guān)的操作，EcoRⅠ、BamHⅠ為限制酶，它們的識別序列及切割位點(diǎn)如表所示。請回答下列問題：
| 限制酶 | 識別序列和切割位點(diǎn) |
| EcoRⅠ | G↓AATTC |
| BamHⅠ | G↓GATTC |
干擾素基因兩端的部分核苛酸序列
干擾素基因兩端的部分核苛酸序列
?？蒲腥藛T還在兩種引物的一端分別加上了 GAATTC
GAATTC
和 GGATCC
GGATCC
序列，以便于后續(xù)的剪切和連接。（2）過程②所構(gòu)建的基因表達(dá)載體中未標(biāo)注出的必需元件還有
復(fù)制原點(diǎn)
復(fù)制原點(diǎn)
，過程③中需先用 Ca2+
Ca2+
處理農(nóng)桿菌以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入細(xì)胞。（3）科研人員認(rèn)為，將轉(zhuǎn)干擾素基因的人參愈傷組織加工成的藥物比單純干擾素的療效要好，其依據(jù)是
將干擾素的治療作用與人參的滋補(bǔ)作用相結(jié)合，能在抗病毒、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)等方面發(fā)揮協(xié)同作用
將干擾素的治療作用與人參的滋補(bǔ)作用相結(jié)合，能在抗病毒、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)等方面發(fā)揮協(xié)同作用
。（4）孕婦即使食用人參滋補(bǔ)，但隨著其妊娠年齡的增加，21三體綜合征的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)在不斷增加，孕婦需要進(jìn)行產(chǎn)前診斷來預(yù)防患病孩子的產(chǎn)生。無創(chuàng)基因檢測是產(chǎn)前診斷的常用方法之一。在孕婦的血液中存在胎兒游離的DNA片段，可以對21號染色體上的特有基因DSCR3和非21號染色體上的基因GAPDH（作為參照）進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增，以測定DSCR基因和GAPDH基因的含量，計(jì)算兩種基因劑量的比值如表。
| 樣品數(shù) | DSCR3/GAPDH | |
| 正常人 | 80 | 0.884±0.420 |
| 21三體胎兒 | 5 | 1.867±0.054 |
| 21三體患者 | 7 | 1.810±0.169 |
引物
引物
的設(shè)計(jì)。②從表格看，正常人與21三體患者的比值有差異，其主要原因是
正常人的DSCR3基因數(shù)量比三體患者少
正常人的DSCR3基因數(shù)量比三體患者少
③產(chǎn)前診斷的方法還有羊水檢查，下列有關(guān)敘述正確的是
BCD
BCD
。A．21三體綜合征是由基因突變引起的
B．21三體綜合征是由減數(shù)分裂發(fā)生異常引起的
C．通過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)對脫落在羊水中的胎兒的某些細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，以擴(kuò)大這些細(xì)胞的數(shù)量
D．選擇有絲分裂中期的細(xì)胞進(jìn)行染色體核型分析，判斷胎兒細(xì)胞的染色體數(shù)目是否正常
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】干擾素基因兩端的部分核苛酸序列；GAATTC；GGATCC；復(fù)制原點(diǎn)；Ca2+；將干擾素的治療作用與人參的滋補(bǔ)作用相結(jié)合，能在抗病毒、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)等方面發(fā)揮協(xié)同作用；引物；正常人的DSCR3基因數(shù)量比三體患者少；BCD
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：14引用：1難度：0.6
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1．基因工程技術(shù)又稱為DNA重組技術(shù)，回答相關(guān)問題：
（1）在基因工程中，獲取目的基因主要有兩大途徑，即和從中分離．
（2）利用某植物的成熟葉片為材料，同時(shí)構(gòu)建cDNA文庫和基因組文庫，兩個(gè)文庫相比，cDNA文庫中含有的基因數(shù)目比基因組文庫中的少，其原因是．
（3）在基因表達(dá)載體中，啟動(dòng)子是聚合酶識別并結(jié)合的部位．若采用原核生物作為基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞，最常用的原核生物是．
（4）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞時(shí)，采用最多的方法是法．發(fā)布：2024/12/29 8:0:2組卷：2引用：1難度：0.3 -
2．科研人員利用大腸桿菌構(gòu)建了抗蟲基因文庫。最新研究發(fā)現(xiàn)漏斗蜘蛛中的AH基因控制合成的毒素肽具有顯著的殺蟲效果，現(xiàn)以p-B質(zhì)粒為載體，構(gòu)建 AH基因的cDNA文庫。圖1表示p-B質(zhì)粒，其中Cm/表示氯霉素抗性基因，cdB 基因表達(dá)產(chǎn)物能抑制大腸桿菌 DNA 復(fù)制。圖中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)，且不同種限制酶識別序列不同，其中AiuI、XbaI、SspI和MfeⅠ識別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別是 AG'CT、T'CTAGA、AAT'ATT、C'AATTG。請分析并回答下列問題：
（1）為獲得AH基因的cDNA，先要從漏斗蜘蛛毒素肽分泌細(xì)胞中提取，再通過合成出AH基因的cDNA。若從漏斗蜘蛛其他組織細(xì)胞提取，則難以成功，原因是。
（2）若已知AH基因的cDNA兩端部分序列為：5'-AACTATGCGC……CGTAGCCTCT-3'，請寫出PCR擴(kuò)增該cDNA時(shí)的兩個(gè)引物對應(yīng)的局部序列（前10個(gè)堿基序列），并標(biāo)明5'和3'端：，。一個(gè)初始雙鏈cDNA經(jīng)四輪循環(huán)后，共消耗這兩種引物的數(shù)量為個(gè)。
（3）利用圖中的質(zhì)粒和AH基因構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，宜選用限制酶雙酶切質(zhì)粒，再選用限制酶切割目的基因，將切割后獲得的DNA片段混合，經(jīng)DNA連接酶處理后，再與大腸桿菌混合培養(yǎng)，在含有適量氯霉素的培養(yǎng)基中添加適量冷的，以促進(jìn)轉(zhuǎn)化。
（4）經(jīng)上述處理培養(yǎng)后，其中能繁殖的大腸桿菌中應(yīng)含有的質(zhì)粒是，原因是。發(fā)布：2024/12/29 8:0:2組卷：8引用：1難度：0.6 -
3．基因治療是指將外源正常基因?qū)氚屑?xì)胞，以糾正或補(bǔ)償因基因缺陷和異常引起的疾病，以達(dá)到治療的目的．干擾素基因缺失的小鼠不能產(chǎn)生成熟淋巴細(xì)胞，科研人員利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對干擾素基因缺失的小鼠進(jìn)行了基因治療．請回答：
（1）為使干擾素基因在小鼠細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入基因表達(dá)載體的和之間．
（2）將干擾素基因?qū)隕S細(xì)胞的方法是，采用可以鑒定目的基因是否插入到受體細(xì)胞染色體DNA分子上，再將能正常表達(dá)干擾素的細(xì)胞轉(zhuǎn)入到小鼠體內(nèi)，這種治療方法稱為．導(dǎo)入ES細(xì)胞而不是導(dǎo)入上皮細(xì)胞是因?yàn)镋S細(xì)胞在功能上具有．
（3）干擾素基因缺失的小鼠易患某種細(xì)菌導(dǎo)致的肺炎，引起這種現(xiàn)象的原因是小鼠缺少成熟的淋巴細(xì)胞，降低了小鼠免疫系統(tǒng)的功能．
（4）用于基因治療的基因有三類，一類是把正常基因?qū)胗谢蛉毕莸募?xì)胞中，以表達(dá)出正常性狀來治療，第二類是反義基因，即通過產(chǎn)生的mRNA分子與病變基因產(chǎn)生的進(jìn)行互補(bǔ)結(jié)合，來阻斷非正常蛋白質(zhì)的合成；第三類是編碼可以殺死癌細(xì)胞的蛋白酶基因．發(fā)布：2024/12/29 8:0:2組卷：24引用：2難度：0.5
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