如圖為“乙肝基因工程疫苗”生產(chǎn)和使用過程圖解,質(zhì)粒上箭頭所指部位為相應(yīng)的限制性內(nèi)切核酸酶的切割位點。質(zhì)粒中l(wèi)acZ基因可使細(xì)菌利用加入培養(yǎng)基的物質(zhì)X-gal,使菌落顯現(xiàn)出藍(lán)色;若無該基因,菌落則成白色。請回答下列問題:
(1)構(gòu)建基因表達(dá)載體時,雙酶切與單酶切相比,其好處可防止 目的基因自身環(huán)化目的基因自身環(huán)化。根據(jù)圖示,該過程中獲取目的基因最好使用的限制性內(nèi)切核酸酶是 BamHⅠ和EcoRⅠBamHⅠ和EcoRⅠ。
(2)過程②需要先將大腸桿菌用 Ca2+Ca2+處理。
(3)篩選轉(zhuǎn)基因成功的大腸桿菌,需要在培養(yǎng)基中加入 青霉素和X-gal青霉素和X-gal,如果出現(xiàn) 白色白色菌落,說明基因表達(dá)載體成功轉(zhuǎn)入大腸桿菌。
【答案】目的基因自身環(huán)化;BamHⅠ和EcoRⅠ;Ca2+;青霉素和X-gal;白色
【解答】
【點評】
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