科研人員通過敲除里氏木霉基因組中去乙?;富颍℉DAC),探究組蛋白乙?;瘜w維素酶基因表達的影響,其主要過程如圖1。請據(jù)圖回答問題。

(1)PCR反應體系中,除加入引物和模板DNA外,一般還需要加入 Taq酶、dNTP(緩沖液、Mg2+)等Taq酶、dNTP(緩沖液、Mg2+)等。在最后一個循環(huán)結(jié)束后通常還需要維持72℃7min,其目的是 使子鏈充分延伸(或充分反應,獲得更多的完整目的片段,或獲得更多的完整目的片段)使子鏈充分延伸(或充分反應,獲得更多的完整目的片段,或獲得更多的完整目的片段)。
(2)引物設計是PCR的關鍵,本研究中引物R1的5'端添加與引物Fc互補的序列,其目的是 便于H1和GR拼接(便于PCR4時形成H1-GR融合基因)便于H1和GR拼接(便于PCR4時形成H1-GR融合基因)。在PCR5中加入的引物是 R2和FGR2和FG。
(3)在原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化過程中,加入適量的CaCl2和PEG溶液,其目的是 促進外源DNA分子進入原生質(zhì)體(或使原生質(zhì)體變成感受態(tài))促進外源DNA分子進入原生質(zhì)體(或使原生質(zhì)體變成感受態(tài))。涂布時,涂布器用 灼燒滅菌(或酒精引燃)灼燒滅菌(或酒精引燃)法滅菌后將原生質(zhì)體接種到含 新霉素新霉素的固體培養(yǎng)基上篩選。
(4)為探究敲除基因HDAG后對纖維素酶基因(CBHI、EGLI)和纖維素酶基因激活因子基因XYR1轉(zhuǎn)錄的影響,研究中先提取 (培養(yǎng)到第5天的)兩類菌株細胞的總RNA(或總RNA)(培養(yǎng)到第5天的)兩類菌株細胞的總RNA(或總RNA),再利用熒光RT-PCR技術檢測,結(jié)果如圖2。依據(jù)結(jié)果可以得出的結(jié)論是 敲除基因HDAC使細胞中組蛋白去乙?;溉狈?,細胞中組蛋白乙酰化程度高,可以顯著提高纖維素酶基因的表達敲除基因HDAC使細胞中組蛋白去乙酰化酶缺乏,細胞中組蛋白乙?;潭雀?,可以顯著提高纖維素酶基因的表達。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】Taq酶、dNTP(緩沖液、Mg2+)等;使子鏈充分延伸(或充分反應,獲得更多的完整目的片段,或獲得更多的完整目的片段);便于H1和GR拼接(便于PCR4時形成H1-GR融合基因);R2和FG;促進外源DNA分子進入原生質(zhì)體(或使原生質(zhì)體變成感受態(tài));灼燒滅菌(或酒精引燃);新霉素;(培養(yǎng)到第5天的)兩類菌株細胞的總RNA(或總RNA);敲除基因HDAC使細胞中組蛋白去乙?;溉狈?,細胞中組蛋白乙?;潭雀撸梢燥@著提高纖維素酶基因的表達
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:33引用:2難度:0.7
相似題
-
1.數(shù)字PCR技術是一種核酸分子絕對定量技術,其原理如圖所示。下列有關敘述正確的是( ?。?img alt src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
A.應根據(jù)目的基因的一段已知序列設計兩種引物 B.PCR每一循環(huán)包括變性、復性和延伸三個過程 C.PCR結(jié)束后有靶分子的反應單位能檢測出熒光 D.每個反應單位中都需要加入解旋酶和耐高溫DNA聚合酶 發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:7引用:2難度:0.6 -
2.科學家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力,利用PCR定點突變技術改造Rubisco酶基因,從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題:
(1)PCR定點突變技術屬于
(2)PCR過程所依據(jù)的原理是
(3)目的基因進入受體細胞內(nèi),并在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程稱為
(4)另有一些科學家利用生物技術將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募毎酥?,?jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關敘述錯誤的是
A.選擇受精卵作為外源基因的受體細胞是因為這種細胞的全能性最容易表達
B.采用DNA分子雜交技術可檢測外源基因在小鼠細胞內(nèi)是否成功表達
C.人的生長激素基因能在小鼠細胞表達,說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D.將轉(zhuǎn)基因小鼠體細胞進行核移植(克?。?,可以獲得多個具有外源基因的后代發(fā)布:2025/1/16 8:0:1組卷:14引用:2難度:0.6 -
3.下列關于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是( ?。?/h2>
A.在凝膠中DNA分子的遷移速率主要和DNA分子的大小、構象等有關 B.凝膠中DNA分子通過染色,可以在波長300nm的紫外燈下被檢測出來 C.該實驗用到的緩沖液和酶,使用前為加快融化速度,從冰箱取出直接水浴加熱 D.電泳技術可以用于人類親子鑒定、生物間親緣關系的鑒定 發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7