通過基因工程技術(shù)能大量生產(chǎn)人生長激素。圖1所示為人工構(gòu)建的大腸桿菌質(zhì)粒pBR322，是由三種質(zhì)粒經(jīng)復(fù)雜重組過程而構(gòu)建。其上含氨芐青霉素抗性基因（Amp^r ）、四環(huán)素抗性基因（Tet^t）。圖2為相關(guān)限制酶的識別序列和酶切位點。請回答下列問題：

（1）人工構(gòu)建pBR322質(zhì)粒需要的酶有

限制酶、DNA連接酶

限制酶、DNA連接酶

。
（2）生產(chǎn)生長激素需從人垂體細胞中提取mRNA，逆轉(zhuǎn)錄得到DNA，以該DNA為

模板

模板

進行大量復(fù)制，獲得 相應(yīng)的目的基因。
（3）為了構(gòu)建重組質(zhì)粒，采用Pst I、EcoR I處理目的基因和質(zhì)粒，與只用Pst I處理相比，這樣操作的優(yōu)勢是：

用PstⅠ、EcoRⅠ處理目的基因和質(zhì)粒，因形成的黏性末端不同可避免目的基因—目的基因（環(huán)化）、質(zhì)?！|(zhì)粒（環(huán)化）等錯誤連接形式（避免產(chǎn)生錯誤連接方式即給分）

用PstⅠ、EcoRⅠ處理目的基因和質(zhì)粒，因形成的黏性末端不同可避免目的基因—目的基因（環(huán)化）、質(zhì)?！|(zhì)粒（環(huán)化）等錯誤連接形式（避免產(chǎn)生錯誤連接方式即給分）

。將構(gòu)建的重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌后，為了排除普通大腸桿菌（無pBR322質(zhì)粒）、空質(zhì)粒大腸桿菌（含pBR322質(zhì)粒但沒有目的基因）的干擾，進行了進一步檢測。配制甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲培養(yǎng)基含四環(huán)素，乙培養(yǎng)基含四環(huán)素和氨芐青霉素。含目的基因的大腸桿菌在甲培養(yǎng)基上

能

能

（填“能”或“不能”）生存，在乙培養(yǎng)基上

不能

不能

（填“能”或“不能”）生存。
（4）導(dǎo)入受體細胞后，常用

抗原-抗體雜交

抗原-抗體雜交

技術(shù)檢測生長激素 在大腸桿菌中是否成功表達。
（5）基因工程的應(yīng)用十分廣闊，可用轉(zhuǎn)基因牛制作乳腺生物反應(yīng)器，從乳汁中提取藥物，則該操作過程中選擇的受體細胞是

牛的受精卵

牛的受精卵

，原因是

動物受精卵具有全能性（動物不能像植物那樣，利用一個除受精卵以外的獨立的體細胞直接培養(yǎng)成完整的個體）

動物受精卵具有全能性（動物不能像植物那樣，利用一個除受精卵以外的獨立的體細胞直接培養(yǎng)成完整的個體）

。