先鋒植物是指能在嚴(yán)重缺乏土壤、水分的荒漠化地區(qū)生長的植物?？茖W(xué)家利用有關(guān)限制酶（表中“↓”處表示限制酶作用位點）、耐干旱基因（圖1）、質(zhì)粒（圖2）培育某種先鋒植物。已知以DNA為模板合成子鏈DNA或 mRNA時，都是從引物的3'端進(jìn)行延伸?；卮鹣铝袉栴}：

限制酶	BamHⅠ	Sau3AⅠ	BclⅠ	EcoRⅠ
識別序列	-G↓GATCC-	-↓GATC-	-T↓GATCA-	-G↓AATTC-

（1）用PCR技術(shù)擴(kuò)增耐干旱基因時，需選用引物

B、C

B、C

（字母“A、B、C、D”中選），在擴(kuò)增過程中，進(jìn)行冷卻后，溫度又升至70-75℃的目的是

有利于耐高溫DNA聚合酶（或Taq酶）從引物起始進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成

有利于耐高溫DNA聚合酶（或Taq酶）從引物起始進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成

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（2）圖1、圖2中，為利于耐干旱基因的定向插入和減少隨意連接，需要用上表中的限制酶

EcoRⅠ和BamHⅠ

EcoRⅠ和BamHⅠ

處理含耐干旱基因的DNA片段，同時還需要用限制酶

EcoRⅠ和BclⅠ

EcoRⅠ和BclⅠ

處理質(zhì)粒。
（3）基因表達(dá)載體構(gòu)建后，需要把

①④

①④

（填寫圖2中數(shù)字序號）之間的堿基序列轉(zhuǎn)移到先鋒植物細(xì)胞中，這利用了農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上T-DNA

可轉(zhuǎn)移并整合到受體細(xì)胞染色體DNA上

可轉(zhuǎn)移并整合到受體細(xì)胞染色體DNA上

的特性。
（4）將耐干旱基因?qū)胂蠕h植物后，還需要進(jìn)行檢測與鑒定。請設(shè)計一個簡單實驗方案，以檢測耐干旱基因是否翻譯為蛋白質(zhì)（簡要敘述實驗思路）

從導(dǎo)入耐干旱基因的先鋒植物中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交

從導(dǎo)入耐干旱基因的先鋒植物中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交

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