我國在國際上首次明確了病毒mRNA“加帽”后形成成熟mRNA的關(guān)鍵酶分子，并且該分子在各突變株中高度保守，在人體中沒有同源物，為發(fā)展新型、安全的廣譜抗病毒藥物提供了全新靶點，為優(yōu)化針對“加帽”分子的抗病毒藥物提供了關(guān)鍵科學(xué)依據(jù)。
（1）SARS-CoV-2在呼吸道黏膜上皮細胞內(nèi)合成的mRNA“加帽”成熟需要的關(guān)鍵酶分子是

RNA聚合酶

RNA聚合酶

，如果以該酶分子為靶點找到了相應(yīng)的抗體，區(qū)別于一般藥物治療更具優(yōu)越性，理由是

關(guān)鍵酶分子高度保守，在人體中沒有同源物

關(guān)鍵酶分子高度保守，在人體中沒有同源物

。
（2）加端PCR是使擴增產(chǎn)物的末端加上一段DNA順序的PCR，加端PCR的引物被設(shè)計成除與模板配對的那一部分以外再加上若干堿基，以便能使擴增產(chǎn)物的末端加上額外的一段DNA?？蒲腥藛T首先獲取了“加帽”關(guān)鍵酶分子抗體的mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA（互補的DNA鏈）。
①采用PCR技術(shù)對cDNA擴增了n代，則第n代共需要引物

2^n-1

2^n-1

個。
②構(gòu)建基因表達載體時，為了使目的基因的兩端與質(zhì)粒相應(yīng)位置具有相同的限制酶切割位點，據(jù)表格和圖分析，在PCR擴增“加帽”關(guān)鍵酶分子抗體基因時設(shè)計的引物末端需要加上的最佳額外DNA序列是

5'GGATCC

5'GGATCC

和

5'AAGCTT

5'AAGCTT

。

酶	BamHⅠ	SacⅠ	HindⅢ	XbaⅠ
識別序列	5′GGATCC	5′GAGCTC	5′AAGCTT	5′TCTAGA

（3）2022年3月15日，第九版新冠診療方案發(fā)布了國家藥監(jiān)局批準(zhǔn)的、我國自主研制的特異性抗新冠病毒藥物一PF-07321332/利托那韋片單克隆抗體。單克隆抗體制備過程中取免疫陽性小鼠的

B淋巴細胞

B淋巴細胞

細胞與骨髓瘤細胞混合培養(yǎng)，融合后最終篩選出具有

既能無限增殖又能分泌特異性抗體

既能無限增殖又能分泌特異性抗體

特點的細胞進行體內(nèi)或體外培養(yǎng)制備抗體。單克隆抗體的優(yōu)點是

特異性強、靈敏度高、可大量制備

特異性強、靈敏度高、可大量制備

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