纖維素酶包括葡聚糖酶和葡萄糖苷酶,前者能將纖維素分解成纖維二糖。研究發(fā)現(xiàn),在催化纖維素分解的過程中,葡聚糖酶的活性會下降,研究人員發(fā)現(xiàn)產(chǎn)物纖維二糖與葡聚糖酶的第248位精氨酸和第385位酪氨酸的側(cè)鏈基團(tuán)發(fā)生相對作用,形成封閉結(jié)構(gòu),阻礙了纖維二糖的釋放,繼而抑制酶的活性。請回答下列問題:
(1)根據(jù)題干信息,可利用蛋白質(zhì)工程來提高葡聚糖酶的活性。蛋白質(zhì)工程的基本思路是 以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。
(2)如果要了解改造第248位精氨酸或改造第385位酪氨酸對葡聚糖酶活性所產(chǎn)生的作用的大小,該如何設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)?簡要寫出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的思路:依次對第248位精氨酸或第385位酪氨酸進(jìn)行改造,通過與兩種氨基酸都存在時(shí)的葡聚糖酶活性進(jìn)行比較,來推測改造的氨基酸對葡聚糖酶活性的影響,進(jìn)而判斷每個(gè)氨基酸作用的相對大小依次對第248位精氨酸或第385位酪氨酸進(jìn)行改造,通過與兩種氨基酸都存在時(shí)的葡聚糖酶活性進(jìn)行比較,來推測改造的氨基酸對葡聚糖酶活性的影響,進(jìn)而判斷每個(gè)氨基酸作用的相對大小。
(3)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增改造后的葡聚糖酶基因,其擴(kuò)增過程一般分為三步。擴(kuò)增產(chǎn)物常通過 電泳電泳來鑒定,若實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增條帶,可能的原因是 引物特異性不高引物特異性不高(答出一點(diǎn)即可)。
【考點(diǎn)】蛋白質(zhì)工程基本原理;DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定.
【答案】以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求;依次對第248位精氨酸或第385位酪氨酸進(jìn)行改造,通過與兩種氨基酸都存在時(shí)的葡聚糖酶活性進(jìn)行比較,來推測改造的氨基酸對葡聚糖酶活性的影響,進(jìn)而判斷每個(gè)氨基酸作用的相對大??;電泳;引物特異性不高
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:15引用:1難度:0.6
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