圖甲為構(gòu)建重組質(zhì)粒過程中的三種備選質(zhì)粒，其中Ap為氨芐青霉素抗性基因，Tc為四環(huán)素抗性基因。圖乙為培育轉(zhuǎn)AFPs基因（抗凍基因）番茄的示意圖，外源DNA和質(zhì)粒上均標出了酶切位點及相關(guān)抗性基因，請回答下列問題。
（1）圖甲中通常選用質(zhì)粒C構(gòu)建重組質(zhì)粒，而不選用質(zhì)粒A或質(zhì)粒B的原因分別是質(zhì)粒A中沒有標記基因，質(zhì)粒B的復制原點中含有HindⅢ酶切位點質(zhì)粒A中沒有標記基因，質(zhì)粒B的復制原點中含有HindⅢ酶切位點。
（2）據(jù)圖乙分析，若需使用插入滅活法篩選并鑒定重組質(zhì)粒，應(yīng)優(yōu)先選用限制酶BamHⅠ和HindⅢBamHⅠ和HindⅢ切割目的基因和質(zhì)粒。
（3）在構(gòu)建基因表達載體過程中常把兩個啟動子串聯(lián)在一起形成雙啟動子，加在目的基因上游。雙啟動子的作用可能是保證目的基因的高效轉(zhuǎn)錄（高效表達）保證目的基因的高效轉(zhuǎn)錄（高效表達）。
（4）圖乙農(nóng)桿菌中的質(zhì)粒應(yīng)含有T-DNA，其作用是攜帶目的基因進入番茄細胞并整合到番茄細胞的染色體DNA攜帶目的基因進入番茄細胞并整合到番茄細胞的染色體DNA。若要獲得抗凍能力更強的抗凍番茄，可以對AFPs基因進行改造，最終得到相應(yīng)的蛋白質(zhì)，該過程需用到蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)工程。
（5）為使改造后的AFPs基因能夠表達，人工設(shè)計質(zhì)粒D并對它的多個酶切位點進行研究。若用HindⅢ酶或KpnⅠ酶單獨切割質(zhì)粒D，均獲得一條長鏈，若用HindⅢ酶和EcoRⅠ酶同時切割，則獲得2個500bp和1個2666bp片段，若用KpnⅠ酶和EcoRⅠ酶同時切割，則獲得2個250bp和1個3166bp片段。若以HindⅢ酶切割位點為計算起點，則KpnⅠ酶切割位點與HindⅢ酶切割位點最短長度為750bp750bp。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】質(zhì)粒A中沒有標記基因，質(zhì)粒B的復制原點中含有HindⅢ酶切位點；BamHⅠ和HindⅢ；保證目的基因的高效轉(zhuǎn)錄（高效表達）；攜帶目的基因進入番茄細胞并整合到番茄細胞的染色體DNA；蛋白質(zhì)；750bp
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：6引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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