腸道病毒71型（EV71）為單股正鏈RNA病毒，是引起手足口病的主要病原體之一。在EV71中，病毒結(jié)構(gòu)蛋白1（VP1）為主要的中和抗原（中和抗原與中和抗體結(jié)合后能阻止病原體入侵與增殖），圖1為利用重組大腸桿菌表達(dá)VP1蛋白，并以VP1蛋白為抗原制備單克隆抗體的過程?；卮鹨韵聠栴}。
（1）重組大腸桿菌中，由EV71病毒的RNA構(gòu)建cDNA需經(jīng)過 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄過程，隨后cDNA通過PCR技術(shù)擴增。將目的基因?qū)氪竽c桿菌需要構(gòu)建表達(dá)載體，常用的表達(dá)載體是質(zhì)粒質(zhì)粒。
（2）在小鼠腹腔內(nèi)注射VP1蛋白進(jìn)行免疫，在35天獲取B淋巴細(xì)胞懸液進(jìn)行融合。在獲取B淋巴細(xì)胞前3天需在腹腔再次注射VP1蛋白，這樣做的原因是 二次免疫后，產(chǎn)生的B淋巴細(xì)胞更多二次免疫后，產(chǎn)生的B淋巴細(xì)胞更多。
（3）缺失HPRT基因的細(xì)胞無法在HAT培養(yǎng)基中生存，HAT培養(yǎng)基可以篩選出骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞，其它細(xì)胞都會死亡。據(jù)此推測，在單克隆抗體制備過程中缺失HPRT基因的細(xì)胞是 骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞（填“大腸桿菌”“B淋巴細(xì)胞”“骨髓瘤細(xì)胞”）。
（4）在雜交瘤細(xì)胞篩選培養(yǎng)過程中需在培養(yǎng)基中添加胎牛血清，并置于37℃、50mL/LCO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)箱中CO2的作用是 維持pH值穩(wěn)定維持pH值穩(wěn)定。
（5）圖2是研究人員對不同單克隆抗體（A/B）的檢測結(jié)果。哪一種單克隆抗體適合進(jìn)入下一步研制？判斷并說出理由：單克隆抗體A；能特異性的識別病毒且中和效果好單克隆抗體A；能特異性的識別病毒且中和效果好。
（6）該單克隆抗體成功制備后，對于防治手足口病有什么作用？快速檢測是否感染，有效治療患者快速檢測是否感染，有效治療患者。
【考點】單克隆抗體及其應(yīng)用．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄；質(zhì)粒；二次免疫后，產(chǎn)生的B淋巴細(xì)胞更多；骨髓瘤細(xì)胞；維持pH值穩(wěn)定；單克隆抗體A；能特異性的識別病毒且中和效果好；快速檢測是否感染，有效治療患者
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：26引用：1難度：0.5
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1．CD47是一種跨膜糖蛋白，它可與巨噬細(xì)胞表面的信號調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6～5倍，導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱。科學(xué)家推測，抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細(xì)胞的抑制作用，為此他們按照如圖流程進(jìn)行了實驗。下列敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：7引用：3難度：0.6 -
2．雙特異性抗體是指一個抗體分子可以與兩個不同抗原或同一抗原的兩個不同抗原表位相結(jié)合，目前最常利用雜交瘤雜交法來制備。長春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉，其所含的長春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)（免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù)）生產(chǎn)能同時識別癌胚抗原和長春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過程。請分析回答下列問題：
（1）與植物體細(xì)胞雜交相比，圖2中過程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是，過程②選用的骨髓瘤細(xì)胞（選填“能”或“不能”）在HAT培養(yǎng)基上生長。
（2）對③篩選出的雜交瘤細(xì)胞，還需進(jìn)行和，才能篩選出足夠量的既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。與傳統(tǒng)血清抗體相比，單克隆抗體最主要的優(yōu)點是（答出一點）。
（3）圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是。圖2方框內(nèi)需要經(jīng)過次篩選，才能獲取單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞。體外培養(yǎng)到一定時期的單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞會因為、有害代謝物的積累和培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻，需進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
（4）與直接使用長春堿相比，將長春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥，對人體的副作用更小，原因是。發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：21引用：4難度：0.5 -
3．使用高效的細(xì)胞毒素藥物進(jìn)行化療可以有效殺傷腫瘤細(xì)胞但細(xì)胞毒素沒有特異性，在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時還會對健康細(xì)胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應(yīng)用?？贵w一藥物偶聯(lián)物（ADC）通過將細(xì)胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，實現(xiàn)了對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物（如細(xì)胞毒素）三部分組成，它的作用機制如圖所示。下列敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 3:30:1組卷：18引用：2難度：0.7
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