養(yǎng)殖家禽的飼料中富含谷物，纖維素是谷物的重要成分，但家禽消化道中缺少能降解纖維素的酶，阻礙了家禽對飼料的吸收與利用。研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)改造乳酸桿菌，將其添加于飼料中，以提高家禽養(yǎng)殖效率。
（1）枯草芽孢桿菌分泌可降解纖維素的一種酶，這種酶由W基因編碼。為在乳酸桿菌中表達W基因，需使用圖1中質(zhì)粒為載體。圖2為克隆得到的含W基因的DNA片段，W基因以乙鏈為轉(zhuǎn)錄模板鏈，轉(zhuǎn)錄時mRNA自身延伸的方向為5'→3'。

①很多啟動子具有物種特異性，在圖1質(zhì)粒中插入W基因，其上游啟動子應(yīng)選擇

B

B

（填正確選項前字母）。
A.枯草芽孢桿菌啟動子
B.乳酸桿菌啟動子
C.農(nóng)桿菌啟動子
②下表是幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1.圖2中標注了相關(guān)限制酶的酶切位點。

限制酶	EcoRI	BamH I	KpnI	Mfe I	HindIII
識別序列及切割位點

根據(jù)上述信息，應(yīng)使用限制酶

MfeⅠ、HindⅢ

MfeⅠ、HindⅢ

切割圖1中質(zhì)粒，使用限制酶

EcoRⅠ、HindⅢ

EcoRⅠ、HindⅢ

切割圖2中含W基因的DNA片段，以獲得能正確表達W基因的重組質(zhì)粒。所得重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化乳酸桿菌后，使用含抗生素

氨芐青霉素

氨芐青霉素

的培養(yǎng)基篩選，以得到轉(zhuǎn)入W基因的乳酸桿菌。
（2）為確定導入重組質(zhì)粒的乳酸桿菌是否具有分解纖維素的能力，研究人員用液體培養(yǎng)基分別培養(yǎng)如表所示菌種。所得部分菌液接種于固體鑒定培養(yǎng)基上，另取部分菌液上清液測定酶活力，實驗方案及測定結(jié)果如表所示。

菌種	酶活性相對值
乳酸桿菌	未檢出
X	未檢出
導入了重組質(zhì)粒的乳酸桿菌	0.96

表中的X應(yīng)為

導入空質(zhì)粒（或“空載體”）的乳酸桿菌

導入空質(zhì)粒（或“空載體”）的乳酸桿菌

。若要檢測導入重組質(zhì)粒的乳酸桿菌是否合成了纖維素酶的方法是

抗原-抗體雜交

抗原-抗體雜交

。
（3）解決谷物中纖維素難以被消化吸收的另一思路是將W基因轉(zhuǎn)入家禽中，使轉(zhuǎn)基因家禽消化道特異表達能夠降解纖維素的酶。采用顯微注射的方法將重組質(zhì)粒導入

（家禽）受精卵

（家禽）受精卵

細胞中，上述研究方法與該思路相比，有哪些優(yōu)點

家禽轉(zhuǎn)基因難度大，成本高，且通過家禽轉(zhuǎn)基因只能改造一種家禽，本實驗通過飼料添加轉(zhuǎn)基因乳酸桿菌可滿足各種家禽需要；轉(zhuǎn)基因家禽可能存在食物安全性問題，將轉(zhuǎn)基因乳酸桿菌加入飼料比較安全；轉(zhuǎn)基因乳酸桿菌易擴大培養(yǎng)，生產(chǎn)成本低

家禽轉(zhuǎn)基因難度大，成本高，且通過家禽轉(zhuǎn)基因只能改造一種家禽，本實驗通過飼料添加轉(zhuǎn)基因乳酸桿菌可滿足各種家禽需要；轉(zhuǎn)基因家禽可能存在食物安全性問題，將轉(zhuǎn)基因乳酸桿菌加入飼料比較安全；轉(zhuǎn)基因乳酸桿菌易擴大培養(yǎng)，生產(chǎn)成本低

（寫出2點）。