線蟲是一種危害極大的植物病原生物,給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)帶來巨大危害。相比于物理防治和化學(xué)防治,生物防治有不易使線蟲產(chǎn)生抗性及生態(tài)安全等明顯優(yōu)勢(shì),近年來逐漸成為研究熱點(diǎn)。放線菌在自然界中分布廣泛,其可以產(chǎn)生多種具有生物活性的次級(jí)代謝產(chǎn)物——抗生素。殺線蟲農(nóng)用抗生素就是由放線菌發(fā)酵產(chǎn)生的。云南轎子山土壤類型豐富,原生植被類型多樣,是放線菌資源篩選的理想生境。以下是某科研團(tuán)隊(duì)對(duì)
放線菌的采集和分離過程,請(qǐng)回答問題:
(1)該團(tuán)隊(duì)在轎子山不同位置采集得到90份土樣,應(yīng)盛放于
滅菌
滅菌
處理過的信封中帶回以待分離。
(2)培養(yǎng)基制備:采用改良酵母膏一麥芽汁液體培養(yǎng)基進(jìn)行放線菌發(fā)酵液制備。培養(yǎng)基配方中除了主要成分(如酵母膏、麥芽膏、胰蛋白胨)外,還應(yīng)添加 水、無機(jī)鹽、特殊營養(yǎng)物質(zhì)
水、無機(jī)鹽、特殊營養(yǎng)物質(zhì)
。
(3)放線菌分離:稱取每份土樣,自然風(fēng)干并干熱處理,加入裝有無菌水的三角瓶中搖床振蕩培養(yǎng)得到土壤懸液。振蕩培養(yǎng)的原因是 增加溶氧量;使菌體與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸
增加溶氧量;使菌體與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸
。菌種純化方法如圖,為 稀釋涂布平板
稀釋涂布平板
法。統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌實(shí)際數(shù)目低,原因是 兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起形成一個(gè)菌落
兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起形成一個(gè)菌落
。
(4)殺線蟲活性放線菌篩選:將分離純化的各組放線菌分別接種于含有線蟲的液體培養(yǎng)基中,定期鏡檢,記錄各組線蟲死亡情況。結(jié)果如下表:
菌株編號(hào) |
線蟲致死率(%) |
KC47 |
54.0 |
KC62 |
64.0 |
KC7 |
90.0 |
KC113 |
87.0 |
KC135 |
67.0 |
為提高實(shí)驗(yàn)的嚴(yán)謹(jǐn)性,應(yīng)設(shè)置對(duì)照組,對(duì)照組的處理為
將等量的無菌水接種于含有線蟲的液體培養(yǎng)基中
將等量的無菌水接種于含有線蟲的液體培養(yǎng)基中
。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,應(yīng)選用菌株
KC7
KC7
(填菌株編號(hào))作為目的菌株擴(kuò)大培養(yǎng),并使用
甘油管藏
甘油管藏
法長期保存。