如圖所示PIJ702是一種常用質(zhì)粒，其中tsr為硫鏈絲菌素（一種抗生素）抗性基因；mel為黑色素合成基因，其表達(dá)能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落；而限制酶SacⅠ、SphⅠ、BglⅡ在pIJ702上分別只有一處識(shí)別序列。
回答下列問題：
（1）限制酶可以識(shí)別雙鏈DNA中特定核苷酸序列，并使每條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵斷裂。
（2）用限制酶SacⅠ和SphⅠ切取的目的基因，與質(zhì)粒pIJ702上長(zhǎng)度為0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段進(jìn)行置換，構(gòu)建重組質(zhì)粒pZHZ8，上述兩種質(zhì)粒經(jīng)限制酶Bgl1/酶切后所得片段長(zhǎng)度見表1。由此判斷目的基因的片段長(zhǎng)度為 1.41.4kb,且目的基因中含有 11個(gè)BglⅡ切割位點(diǎn)。
表1
| PLJ702 | pZHZ8 | |
| BglⅡ | 5.7kb | 6.7kb |
轉(zhuǎn)化
轉(zhuǎn)化
過程。（4）不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素的固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)狀況如表2所示。若要篩選導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌細(xì)胞，所需硫鏈絲菌素濃度至少應(yīng)在
5
5
μg/mL以上，且菌落的顏色為 白色
白色
。若要檢測(cè)整合到染色體DNA上的目的基因是否發(fā)揮功能作用，首先需檢測(cè)受體細(xì)胞的 RNA
RNA
（填“DNA”或“RNA”），檢測(cè)方法采用 分子雜交
分子雜交
技術(shù)。表2
| 固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度（μg/mL） | 0 | 1 | 2 | 5 | 10 |
| 不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長(zhǎng)狀況 | ++++ | +++ | + | - | - |
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】磷酸二酯鍵；1.4；1；轉(zhuǎn)化；5；白色；RNA；分子雜交
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/5/15 8:0:8組卷：8引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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