人參是一種名貴藥材,具有良好的滋補作用,干擾素在慢性乙肝、丙肝及部分腫瘤的治療中有一定療效。如圖為科研人員制備能合成干擾素的人參愈傷組織細胞的流程。①~④表示相關(guān)的操作,EcoRⅠ、BamHⅠ為限制酶,它們的識別序列及切割位點如表所示。
限制酶 | 識別序列和切割位點 |
EcoRⅠ | G↓AATTC |
BamHⅠ | G↓GATCC |
請分析回答:
(1)步驟①利用PCR技術(shù)擴增干擾素基因時,首先根據(jù)
干擾素基因兩端的部分核苷酸序列
干擾素基因兩端的部分核苷酸序列
設(shè)計并合成引物;同時為了方便后續(xù)的剪切和連接,還應(yīng)在兩種引物的一端分別加上 GAATTC和GGATCC
GAATTC和GGATCC
序列。(2)步驟②基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心,啟動子的作用機理為
能與RNA聚合酶特異性結(jié)合并使其活化驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄過程
能與RNA聚合酶特異性結(jié)合并使其活化驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄過程
,啟動子的上游還必須擁有的DNA片段是 復(fù)制原點
復(fù)制原點
。(3)過程③中T-DNA
不能
不能
(填“能”或“不能”)整合到受體細胞的染色體DNA上,原因是 該受體細胞為根瘤農(nóng)桿菌細胞,是原核生物,無染色體
該受體細胞為根瘤農(nóng)桿菌細胞,是原核生物,無染色體
。過程④可利用 抗原—抗體雜交
抗原—抗體雜交
法進行檢測和篩選。(4)上述將人的干擾素基因?qū)氲饺藚⒌挠鷤M織細胞中仍然可以成功表達出人的干擾素分子,其原因是
生物界共用一套遺傳密碼
生物界共用一套遺傳密碼
。【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】干擾素基因兩端的部分核苷酸序列;GAATTC和GGATCC;能與RNA聚合酶特異性結(jié)合并使其活化驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄過程;復(fù)制原點;不能;該受體細胞為根瘤農(nóng)桿菌細胞,是原核生物,無染色體;抗原—抗體雜交;生物界共用一套遺傳密碼
【解答】
【點評】
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