為探究SHH基因與角化囊腫發(fā)生的相關(guān)性,科研人員利用SHH基因的非模板鏈轉(zhuǎn)錄合成的RNA作為探針,進(jìn)行分子雜交實(shí)驗(yàn),以檢測(cè)SHH基因在角化囊腫中的表達(dá)情況.其基本流程如下圖(Amp表示氨芐青霉素抗性基因;LacZ基因被SHH基因插入后不表達(dá))
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(1)重組載體中SHH基因轉(zhuǎn)錄合成RNA探針時(shí),需要需要(填“需要”或“不需要”)啟動(dòng)子.
(2)步驟②中,用Ca2+處理大腸桿菌,使之成為 感受態(tài)感受態(tài)細(xì)胞,然后導(dǎo)入重組載體.實(shí)驗(yàn)中,用添加氨芐青霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌,未導(dǎo)入質(zhì)粒的細(xì)菌將會(huì)死亡,原因是這些細(xì)菌不含有 AmpAmp基因.
(3)能表達(dá)LacZ基因的大腸桿菌在含有IPTG和X-gal的培養(yǎng)基上會(huì)形成藍(lán)色菌落,易于識(shí)別.根據(jù)上述原理可以初步判斷 白色白色(填“藍(lán)色”或“白色”)菌落中的大腸桿菌為重組菌.
(4)將制備的探針加入角化囊腫切片中,探針將與 SHH轉(zhuǎn)錄的mRNASHH轉(zhuǎn)錄的mRNA形成雜交帶,進(jìn)而判斷SHH基因的轉(zhuǎn)錄情況.
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】需要;感受態(tài);Amp;白色;SHH轉(zhuǎn)錄的mRNA
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:99引用:9難度:0.5
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