科研人員將抗鹽基因轉入普通煙草培育出抗鹽煙草,圖1表示該過程所用的質粒,圖2表示含抗鹽基因的DNA上相關限制酶的酶切位點。限制性核酸內切酶BamHⅠ、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ,它們識別的堿基序列和酶切位點分別為G↓GATCC、T↓GATCA、↓CATC、A↓AGCTT。圖3表示該過程中利用含目的基因的農桿菌進行轉化作用的示意圖?;卮鹣铝袉栴}:
(1)利用逆轉錄獲得的目的基因和從基因組文庫中獲取的目的基因的主要區(qū)別是其不含 內含子、啟動子、終止子等內含子、啟動子、終止子等。
(2)在構建基因表達載體時,目的基因前需要插入啟動子,其作用是 RNA聚合酶的識別和結合位點,驅動基因轉錄出mRNARNA聚合酶的識別和結合位點,驅動基因轉錄出mRNA。
(3)用圖中質粒和目的基因構建基因表達載體時,可以用限制酶BamHⅠ切割質粒,用限制酶Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA片段,與單一酶切相比,這樣做是為了避免 目的基因和質粒自身環(huán)化,目的基因與質粒反向連接目的基因和質粒自身環(huán)化,目的基因與質粒反向連接。
(4)將目的基因插入到植物細胞染色體的DNA上,理由是 使目的基因遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達使目的基因遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達。
(5)將目的基因導入植物細胞常用 農桿菌轉化法農桿菌轉化法,圖3過程 ①①(填序號)中發(fā)生了基因重組。
【考點】基因工程的操作過程綜合;限制性內切核酸酶.
【答案】內含子、啟動子、終止子等;RNA聚合酶的識別和結合位點,驅動基因轉錄出mRNA;目的基因和質粒自身環(huán)化,目的基因與質粒反向連接;使目的基因遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達;農桿菌轉化法;①
【解答】
【點評】
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