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H1是耐鹽細(xì)菌菌株,pDT3是插入了甲基對硫磷分解酶基因(mpd基因)的重組質(zhì)粒。實驗小組將pDT3重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)移到H1菌株中,培育能降解甲基對硫磷的耐鹽工程菌。已知甲基對硫磷是高毒廣譜的殺蟲劑,分解后能產(chǎn)生黃色物質(zhì)?;卮鹣铝袉栴}:
(1)實驗室中,常用PCR擴(kuò)增獲得mpd基因,其原理是
DNA半保留復(fù)制
DNA半保留復(fù)制
。如圖是mpd基因結(jié)構(gòu)的示意圖,其中A~F是引物。為了保證mpd基因在受體細(xì)胞中高度表達(dá),在擴(kuò)增mpd基因時,應(yīng)該選擇的圖中的兩種引物是
C、D
C、D
(填字母),原因是
DNA聚合酶只能從引物的3'端連接脫氧核苷酸
DNA聚合酶只能從引物的3'端連接脫氧核苷酸
擴(kuò)增強(qiáng)啟動子能增強(qiáng)mpd基因的表達(dá)
擴(kuò)增強(qiáng)啟動子能增強(qiáng)mpd基因的表達(dá)


(2)將pDT3重組質(zhì)粒導(dǎo)入H1細(xì)菌細(xì)胞時,一般先用
Ca2+
Ca2+
處理受體細(xì)胞,以便細(xì)胞吸收外源DNA。轉(zhuǎn)化成功后,可用
抗體—抗原雜交
抗體—抗原雜交
的方法檢測受體細(xì)胞內(nèi)是否表達(dá)出了甲基對硫磷分解酶。
(3)試設(shè)計實驗證明,獲得的轉(zhuǎn)基因工程菌能降解甲基對硫磷,且保留了耐鹽能力。
簡要寫出實驗思路:
將轉(zhuǎn)基因工程菌株接種到含甲基對硫磷和一定濃度NaCl的培養(yǎng)基上
將轉(zhuǎn)基因工程菌株接種到含甲基對硫磷和一定濃度NaCl的培養(yǎng)基上
;
培養(yǎng)后觀察到菌落周圍出現(xiàn)黃色圈
培養(yǎng)后觀察到菌落周圍出現(xiàn)黃色圈
。

【答案】DNA半保留復(fù)制;C、D;DNA聚合酶只能從引物的3'端連接脫氧核苷酸;擴(kuò)增強(qiáng)啟動子能增強(qiáng)mpd基因的表達(dá);Ca2+;抗體—抗原雜交;將轉(zhuǎn)基因工程菌株接種到含甲基對硫磷和一定濃度NaCl的培養(yǎng)基上;培養(yǎng)后觀察到菌落周圍出現(xiàn)黃色圈
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/7/8 8:0:10組卷:11引用:2難度:0.6
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  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
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    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
     
     

    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     

    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     

    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
  • 3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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