如圖是VIGS技術(shù)應(yīng)用于研究基因功能的原理示意圖。通過人工合成小分子miRNA，經(jīng)過剪輯后與相關(guān)蛋白結(jié)合形成復(fù)合物，與靶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA結(jié)合，簡便、快速且高效地介導(dǎo)靶基因沉默，以研究基因的功能?；卮鹣铝袉栴}：

（1）植物DNA病毒可以改造為基因沉默的載體。人工合成的miRNA需經(jīng)過

逆轉(zhuǎn)錄

逆轉(zhuǎn)錄

（過程）獲得DNA片段后與DNA病毒載體拼接，重組載體的構(gòu)建要用到

限制酶、DNA連接

限制酶、DNA連接

酶。
（2）如何將病毒載體投送至植物細胞是影響VIGS技術(shù)應(yīng)用的關(guān)鍵因素，常將侵染液用注射器注入植物葉片背面侵染，該方法與基因工程中的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法不同；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法能夠轉(zhuǎn)化成功，利用的主要原理是

Ti質(zhì)粒上的T-DNA轉(zhuǎn)移到被侵染的細胞，并且將其整合到該細胞的染色體DNA上

Ti質(zhì)粒上的T-DNA轉(zhuǎn)移到被侵染的細胞，并且將其整合到該細胞的染色體DNA上

。但農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法仍然有多個技術(shù)缺點不能克服，如目的基因整合到宿主細胞染色體上的位置是隨機的，這對宿主細胞造成的危害可能有

使正常基因發(fā)生突變而不能表達

使正?；虬l(fā)生突變而不能表達

（答出一點）。
（3）圖中a和b過程利用的模板

不同

不同

（填“相同”或“不同”）。根據(jù)圖示，VIGS技術(shù)使

VIGS技術(shù)使目的基因的RNA被降解而不能完成翻譯過程

VIGS技術(shù)使目的基因的RNA被降解而不能完成翻譯過程

，導(dǎo)致靶基因的功能缺失，可據(jù)此研究該基因的功能。
（4）PDS是影響類胡蘿卜素合成的關(guān)鍵酶，若類胡蘿卜素含量過低，則番茄、柑橘等植株會表現(xiàn)幼嫩葉片漂白的癥狀。請用簡單的方法判斷VIGS技術(shù)是否能使番茄的PDS基因沉默：

觀察VIGS技術(shù)處理過的番茄，觀察幼嫩葉片的顏色，若有漂白癥狀，說明能使番茄的PDS基因沉默

觀察VIGS技術(shù)處理過的番茄，觀察幼嫩葉片的顏色，若有漂白癥狀，說明能使番茄的PDS基因沉默

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