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B基因存在于水稻基因組中,僅在體細(xì)胞和精子中正常表達(dá),在卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄。為研究B基因表達(dá)對(duì)卵細(xì)胞的影響,設(shè)計(jì)并完成了如圖實(shí)驗(yàn)來獲取能夠在卵細(xì)胞中表達(dá)B基因的轉(zhuǎn)基因植株,其中融合基因表達(dá)的蛋白質(zhì)能保留兩種蛋白質(zhì)各自的功能?;卮鹣铝邢嚓P(guān)問題:
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(1)研究發(fā)現(xiàn)B基因在水稻卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄,可能的原因是RNA聚合酶不能識(shí)別基因中的
啟動(dòng)子
啟動(dòng)子
。
(2)若要獲得B基因中編碼蛋白的序列,可從水稻的體細(xì)胞或
花粉
花粉
中提取mRNA,在
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
酶的作用下構(gòu)建cDNA文庫?;蚬こ讨凶詈诵牡牟襟E是
基因表達(dá)載體的構(gòu)建
基因表達(dá)載體的構(gòu)建
;表達(dá)載體主要包括目的基因、啟動(dòng)子、
終止子、標(biāo)記基因
終止子、標(biāo)記基因
等。
(3)步驟①常采用
Ca2+
Ca2+
處理。步驟③是植物組織培養(yǎng)過程中的
再分化
再分化
,組織培養(yǎng)過程依據(jù)的原理是
(植物)細(xì)胞的全能性
(植物)細(xì)胞的全能性
。
(4)如何利用Luc基因的作用鑒定轉(zhuǎn)基因植株是否培育成功?
加入熒光素,檢測(cè)植株的卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光
加入熒光素,檢測(cè)植株的卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】啟動(dòng)子;花粉;逆轉(zhuǎn)錄;基因表達(dá)載體的構(gòu)建;終止子、標(biāo)記基因;Ca2+;再分化;(植物)細(xì)胞的全能性;加入熒光素,檢測(cè)植株的卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:17引用:2難度:0.7
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    發(fā)布:2024/10/28 10:30:1組卷:5引用:2難度:0.7
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    發(fā)布:2024/10/28 17:0:2組卷:9引用:2難度:0.7
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    (1科學(xué)家改造乳酸脫氫酶時(shí)需要做的第一步是
     
    。研究發(fā)現(xiàn),要將LDH基因改造成為mLDH(改造后的乳酸脫氫酶)基因,需將LDH第52位的酪氨酸替換為亮氨酸,使得活性中心增大,才能用于生產(chǎn)苯乳酸。
    ①先將LDH基因片段連人載體中,形成環(huán)狀質(zhì)粒(如圖1)。
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    將突變后的序列設(shè)計(jì)在引物1中,以環(huán)狀質(zhì)粒為PCR的
     
    ,再向體系中加入四種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶、
     
    ,以及堿基替換了的引物擴(kuò)增LDH基因,PCR產(chǎn)物的序列便引入了預(yù)期的突變。
    ②上述PCR產(chǎn)物為鏈狀DNA分子,改造后的LDH基因序列位于PCR產(chǎn)物的兩側(cè),需要用
     
    酶將產(chǎn)物兩端連接,獲得含有mLDH基因的質(zhì)粒。
    (2)產(chǎn)生苯乳酸的過程還需FDH酶參與?,F(xiàn)需要構(gòu)建同時(shí)含有mLDH、FDH的基因表達(dá)載體。請(qǐng)你根據(jù)圖2,提出將兩個(gè)基因依次連入載體的思路:
     
    (要體現(xiàn)選用的內(nèi)切酶和連接的先后順序)。
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    (3)上述科學(xué)實(shí)踐屬于生物工程中的
     
    工程。在生命科學(xué)高速發(fā)展的今天,基因改造已十分成熟,但有一些紅線不能觸碰,請(qǐng)你舉出一例我國明令禁止的生物工程應(yīng)用:
     
    。

    發(fā)布:2024/10/28 17:0:2組卷:9引用:2難度:0.6
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