人類的干擾素是由體內(nèi)免疫細(xì)胞合成并分泌的一種糖蛋白，具有抗病毒、抗菌和抗腫瘤等作用，并能參與人體免疫調(diào)節(jié)，因而在臨床醫(yī)學(xué)上用途廣泛。干擾素的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法成本高、產(chǎn)量低，獲得的干擾素在體外不易保存，用生物技術(shù)手段可以解決這些問題。請聯(lián)系所學(xué)知識回答相關(guān)問題：
（1）利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)干擾素，其簡要過程是：
①從健康人體的外周靜脈血中分離出能合成干擾素的免疫細(xì)胞，從其細(xì)胞質(zhì)中提取mRNAmRNA，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄獲取目的基因；
②用限制酶處理載體和目的基因后，用DNA連接酶處理，形成重組載體，該載體的化學(xué)本質(zhì)是DNADNA；
③若選擇大腸桿菌作為受體細(xì)胞，常用的轉(zhuǎn)化方法是用鈣離子處理，使其成為感受態(tài)細(xì)胞用鈣離子處理，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，在一定溫度條件下，完成轉(zhuǎn)化；
④在培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時間后，經(jīng)離心、分離等一系列處理措施后提取產(chǎn)物，對產(chǎn)物進(jìn)行鑒定時可采用抗原抗體雜交抗原抗體雜交技術(shù)。
（2）利用蛋白質(zhì)工程對干擾素進(jìn)行改造，基本途徑是：預(yù)期蛋白質(zhì)的功能→設(shè)計(jì)預(yù)期蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)預(yù)期蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)→推測氨基酸序列推測氨基酸序列→找到對應(yīng)的脫氧核苷酸序列。
（3）利用細(xì)胞工程生產(chǎn)干擾素，其簡要設(shè)計(jì)思路是：將能合成干擾素的免疫細(xì)胞和瘤細(xì)胞融合，篩選出雜交瘤雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)可獲得大量干擾素。
【考點(diǎn)】基因工程在農(nóng)牧、醫(yī)療、食品等方面的應(yīng)用．
【答案】mRNA；DNA；用鈣離子處理，使其成為感受態(tài)細(xì)胞；抗原抗體雜交；設(shè)計(jì)預(yù)期蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)；推測氨基酸序列；雜交瘤
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：27引用：4難度：0.7
相似題
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1．基因編輯是指將外源DNA片段導(dǎo)入染色體DNA特定位點(diǎn)或刪除基因內(nèi)部片段，定點(diǎn)改造基因，獲得預(yù)期的生物體基因序列發(fā)生改變的技術(shù)。如圖是對某生物B基因進(jìn)行基因編輯的過程，該過程中用sgRNA指引內(nèi)切核酸酶Cas9結(jié)合到特定的靶位點(diǎn)。下列分析不合理的是（ ）發(fā)布：2024/12/30 21:30:1組卷：4引用：2難度：0.7 -
2．人類基因組計(jì)劃測定了人體的24條染色體，這24條染色體是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 0:30:1組卷：112引用：7難度：0.7 -
3．學(xué)習(xí)以下材料，回答（1）～（4）題。
利用抑制性tRNA進(jìn)行無義突變遺傳病的治療
無義突變是由于某個堿基的改變使代表某種氨基酸的密碼子突變?yōu)榻K止密碼子（UAA、UAG或UGA），從而使肽鏈合成提前終止，造成蛋白質(zhì)的功能改變，引發(fā)相關(guān)疾病。約有10%～15%的人類基因相關(guān)遺傳疾病是由無義突變引發(fā)的。常規(guī)的基因治療是將正?；虻腸DNA序列或是有治療價值的基因（如CRISPR-Cas9相關(guān)的基因編輯工具）通過一定的方式導(dǎo)入人體靶細(xì)胞內(nèi)，達(dá)到替代或修復(fù)缺陷基因、治療疾病的目的。導(dǎo)入基因插入位置不當(dāng)、過高或過低表達(dá)，都可能會導(dǎo)致副作用。盡管基因編輯可以實(shí)現(xiàn)生理水平的基因表達(dá)，但基因編輯工具引入外源蛋白可能引發(fā)強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)仍然是巨大的挑戰(zhàn)。
抑制性tRNA（sup-tRNA）由天然tRNA改造而來，它的反密碼子通過堿基配對原則可以識別無義突變的終止密碼子，使得mRNA在翻譯至無義突變位點(diǎn)時不啟動翻譯終止而是繼續(xù)向后進(jìn)行翻譯，獲得有功能的全長蛋白。
I型黏多糖貯積癥的病因，是相關(guān)基因發(fā)生無義突變，產(chǎn)生終止密碼子UAG。研究者構(gòu)建小鼠該突變基因mldua和Flag基因融合的載體（圖1），以及針對該無義突變設(shè)計(jì)的sup-tRNA表達(dá)載體（產(chǎn)生的sup-tRNA能夠識別UAG并攜帶酪氨酸Tyr,簡寫作sup-tRNATyr），將其導(dǎo)入細(xì)胞進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)與具有相似作用的化合物G418比較，sup--tRNA的作用更加顯著（圖2）；進(jìn)一步利用重組腺相關(guān)病毒作為載體將sup-tRNA導(dǎo)入患病小鼠模型中，實(shí)驗(yàn)顯示能夠降低黏多糖過度積存，實(shí)現(xiàn)對該病癥的有效治療，其療效可以持續(xù)半年以上。
從整體來看，G418在促進(jìn)跨越無義突變位點(diǎn)繼續(xù)翻譯時引入的氨基酸較為隨機(jī)，而sup-tRNA引入的氨基酸較為單一，且不會影響內(nèi)源tRNA穩(wěn)態(tài)，所以sup-tRNA在個體治療中具有很高的安全性，因而在未來基因突變引起的疾病相關(guān)治療中具有非常大的應(yīng)用前景。
（1）侵染時，作為載體的重組腺相關(guān)病毒與靶細(xì)胞膜上的發(fā)生識別，引發(fā)內(nèi)吞，進(jìn)入細(xì)胞后釋放單鏈DNA作為模板，利用宿主細(xì)胞的催化合成其互補(bǔ)DNA鏈，再經(jīng)過過程產(chǎn)生sup-tRNA。
（2）除了引入的氨基酸較為單一，不影響內(nèi)源tRNA穩(wěn)態(tài)，我們還可推斷，用于治療的sup-tRNA在正常終止密碼子處（填“能”或“不能”）繼續(xù)往后翻譯，具有很高的安全性。
（3）研究者構(gòu)建mldua突變基因和Flag基因融合的載體，目的是通過檢測來確定是否跨越無義突變位點(diǎn)繼續(xù)向后翻譯。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，相比于化合物G418，sup-tRNA在促進(jìn)無義突變位點(diǎn)的翻譯方面更加有效，支持這一結(jié)論的依據(jù)是：。
（4）有文獻(xiàn)報道，已在近1000個不同的人類基因中發(fā)現(xiàn)了7500多個無義突變。常規(guī)的基因治療需要為每種疾病設(shè)計(jì)獨(dú)特的治療策略，這將是一項(xiàng)耗費(fèi)驚人的項(xiàng)目。據(jù)此說明sup-tRNA的應(yīng)用價值。發(fā)布：2025/1/3 8:0:1組卷：26引用：1難度：0.6
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