人乳鐵蛋白（hLF）對(duì)細(xì)菌、真菌和病毒等都有抑制作用。研究人員開展人乳鐵蛋白基因乳腺特異性表達(dá)載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)染研究，主要流程如圖。RT-PCR過(guò)程需先進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄合成DNA，然后再進(jìn)行PCR。圖中AseI、NheI、SalI、BamHⅠ代表相關(guān)限制酶切點(diǎn)，neor為新霉素抗性基因，BLG基因?yàn)锽乳鐵蛋白基因，GFP基因?yàn)榫G色熒光蛋白基因。回答下列問(wèn)題：
（1）過(guò)程①中用到的酶是 逆轉(zhuǎn)錄酶、耐高溫的DNA聚合酶逆轉(zhuǎn)錄酶、耐高溫的DNA聚合酶，經(jīng)過(guò)程①得到的hLH基因不具有的結(jié)構(gòu)是 啟動(dòng)子、終止子、內(nèi)含子啟動(dòng)子、終止子、內(nèi)含子（至少答出2個(gè)）。
（2）過(guò)程②需要用 SalⅠ和BamHⅠSalⅠ和BamHⅠ酶處理pEB質(zhì)粒和添加了相應(yīng)識(shí)別序列的hLH基因，已獲得重組質(zhì)粒。
（3）過(guò)程②中，hLF基因插入到BLG基因之后的目的是 使hLF基因在山羊乳腺上皮細(xì)胞中表達(dá)（或使目的基因表達(dá)）使hLF基因在山羊乳腺上皮細(xì)胞中表達(dá)（或使目的基因表達(dá)）。GFP基因的作用是 用于篩選成功導(dǎo)入hLF基因的乳腺細(xì)胞用于篩選成功導(dǎo)入hLF基因的乳腺細(xì)胞。
（4）過(guò)程③中用到的脂質(zhì)體是由磷脂分子構(gòu)成的，脂質(zhì)體介導(dǎo)利用的原理是 膜的流動(dòng)性膜的流動(dòng)性。若要將hLF基因?qū)胫参锛?xì)胞中表達(dá)，可采用的方法有 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、花粉管通道法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、花粉管通道法（答2種）。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶、耐高溫的DNA聚合酶；啟動(dòng)子、終止子、內(nèi)含子；SalⅠ和BamHⅠ；使hLF基因在山羊乳腺上皮細(xì)胞中表達(dá)（或使目的基因表達(dá)）；用于篩選成功導(dǎo)入hLF基因的乳腺細(xì)胞；膜的流動(dòng)性；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、花粉管通道法
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/8/9 8:0:9組卷：1引用：2難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6