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回答與基因工程和植物克隆有關(guān)的問題:
菁優(yōu)網(wǎng)
(1)從水稻體細(xì)胞中提取總RNA,利用
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
酶獲得B基因編碼蛋白的序列,將該序列和Luc基因(表達的熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生熒光)連接成的融合基因必須連接到表達載體的啟動子和終止子之間,其中啟動子是
RNA聚合酶
RNA聚合酶
的結(jié)合位點。
(2)將重組載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌時,常用氯化鈣處理農(nóng)桿菌的目的是
增加農(nóng)桿菌細(xì)胞壁的通透性
增加農(nóng)桿菌細(xì)胞壁的通透性
。處理后再將農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)移到適宜培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時間,目的是
使農(nóng)桿菌恢復(fù)正常生理狀態(tài)
使農(nóng)桿菌恢復(fù)正常生理狀態(tài)
。
(3)過程②利用了農(nóng)桿菌的T-DNA片段,將目的基因
整合(或轉(zhuǎn)移)
整合(或轉(zhuǎn)移)
到受體細(xì)胞的染色體DNA上,完成后需在培養(yǎng)基中添加
潮霉素
潮霉素
對水稻愈傷組織進行脫菌處理。
(4)借助Luc基因的表達來完成第二次鑒定篩選,具體方法是
檢測加入熒光素的細(xì)胞中是否發(fā)出熒光
檢測加入熒光素的細(xì)胞中是否發(fā)出熒光
。
(5)在植物克隆中,盡量選擇
性狀優(yōu)良、細(xì)胞全能性表達充分
性狀優(yōu)良、細(xì)胞全能性表達充分
的基因型。有研究人員將上述水稻愈傷組織反復(fù)擴增后再誘導(dǎo),都以失敗告終,原因是在
多次繼代培養(yǎng)
多次繼代培養(yǎng)
后喪失細(xì)胞全能性的表達能力。

【答案】逆轉(zhuǎn)錄;RNA聚合酶;增加農(nóng)桿菌細(xì)胞壁的通透性;使農(nóng)桿菌恢復(fù)正常生理狀態(tài);整合(或轉(zhuǎn)移);潮霉素;檢測加入熒光素的細(xì)胞中是否發(fā)出熒光;性狀優(yōu)良、細(xì)胞全能性表達充分;多次繼代培養(yǎng)
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/9/27 11:0:2組卷:2引用:2難度:0.7
相似題
  • 1.目前,科學(xué)家已在牛和山羊等動物乳腺生物反應(yīng)器中表達出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類藥物.下列與之相關(guān)的說法,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:5引用:1難度:0.9
  • 2.最近,科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并將其分泌到尿液中.這是繼哺乳動物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后,在膀胱生物反應(yīng)器研究上另一進展.
    (1)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫荏w細(xì)胞,常用的方法是
     
    .所使用到儀器是
     

    (2)在基因工程中,將目的基因與運載體結(jié)合時,必須用
     
    酶和
     
    酶.常用的運載體有
     
    、
     
    、
     
    等,而作為運載體必須具備相應(yīng)的條件,例如應(yīng)具有
     
    以便進行篩選.進行基因轉(zhuǎn)移時,通常要將外源基因轉(zhuǎn)入動物的
     
    中,原因是
     

    (3)通常采用
     
    技術(shù)檢測外源基因是否插入了小鼠的基因組中.
    (4)在研究膀胱生物反應(yīng)器時,應(yīng)使外源基因在小鼠的
     
    細(xì)胞中特異性表達.
    (5)如果將藥物蛋白基因轉(zhuǎn)入動物如牛、羊的膀胱上皮細(xì)胞中,從轉(zhuǎn)基因牛、羊尿液中提取藥物比從乳汁中提取藥物的更大優(yōu)越性在于
     

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:3引用:1難度:0.3
  • 3.抗凝血酶是一種天然抗凝血劑,在臨床上被廣泛應(yīng)用。目前科學(xué)家已在豬和羊等動物的乳腺生物反應(yīng)器中表達出了人的抗凝血酶,如圖是構(gòu)建抗凝血酶基因表達載體所用的pBR質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及人抗凝血酶基因所在的DNA片段,回答下列問題:
    菁優(yōu)網(wǎng)
    (1)現(xiàn)有以下4種引物,引物A15'-GGACCCCGGG-3';引物B:5'-CATTTCTAGA-3';引物C:5'-CCTGGGGCCC-3';引物D:5'-GTAAAGATCT-3';,利用PCR擴增獲取抗凝血酶基因,應(yīng)選用引物
     
    (填引物名稱),擴增產(chǎn)物可選擇限制酶
     
    切割后再利用E?coliDNA連接酶連接到pBR質(zhì)粒上。
    (2)所選用的pBR質(zhì)粒上含有啟動子,其作用是
     
    ,將構(gòu)建的基因表達載體先導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞,然后將大腸桿菌涂布到含新霉素的選擇培養(yǎng)基上,長出了多個大腸桿菌菌落,這些菌落并非都是目的菌株,原因是
     
    。
    (3)將篩選得到的目的菌株提取質(zhì)粒,再通過
     
    方法導(dǎo)入到豬或羊的
     
    細(xì)胞內(nèi),通過培養(yǎng)即可獲得能表達人抗凝血酶的乳腺生物反應(yīng)器。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:4引用:1難度:0.6
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