科研人員將酵母菌的海藻糖合成酶（TPS）基因轉(zhuǎn)入小麥中，以期獲得具備抗旱特性的小麥。圖1表示載體和預期基因表達載體的結(jié)構(gòu)（注：Bar基因是抗除草劑基因），圖2標注TPS基因的酶切位點以及引物結(jié)合的可能情況。
（1）PCR技術(shù)中的引物可以使DNA聚合酶能夠從引物的 3'3'端開始連接脫氧核苷酸，本實驗可選擇的引物組合為 2、32、3（用圖2中數(shù)字表示）。為了方便構(gòu)建重組質(zhì)粒，所用一對引物的一端需要分別加上 BamHⅠ、SacⅠBamHⅠ、SacⅠ酶（填圖1中限制酶的名稱）的識別序列。
（2）基因表達載體轉(zhuǎn)入細胞后，在獲得的植株葉片上涂抹除草劑，共獲得7株待測個體?，F(xiàn)對篩選出的個體進行DNA水平的檢測。請?zhí)顚懕砀?，完成實驗?br />
| 組別 | 植株編號1-7 | 對照組1 | 對照組2 |
| 模板 | 1-7植株DNA | ① TPS基因（基因表達載體） TPS基因（基因表達載體） |
普通小麥DNA |
| PCR體系中其他物質(zhì) | 緩沖液（添加Mg2+）、水、引物、4種脫氧核苷酸、② 耐高溫的DNA聚合（或Taq） 耐高溫的DNA聚合（或Taq） 酶 |
||
| 電泳結(jié)果 | 編號1、2、4、5、7植株無條帶 編號3、6植株有條帶 |
有條帶 | ③ 無條帶 無條帶 |
不能
不能
（填“能”或“不能”）判定編號3、6植株轉(zhuǎn)基因抗旱小麥研制成功，原因是 還需進行TPS含量的檢測（還需進行轉(zhuǎn)錄、翻譯等分子水平的檢測等）
還需進行TPS含量的檢測（還需進行轉(zhuǎn)錄、翻譯等分子水平的檢測等）
。【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】3'；2、3；BamHⅠ、SacⅠ；TPS基因（基因表達載體）；耐高溫的DNA聚合（或Taq）；無條帶；不能；還需進行TPS含量的檢測（還需進行轉(zhuǎn)錄、翻譯等分子水平的檢測等）
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：4引用：1難度：0.6
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
2．PCR技術(shù)不僅可以擴增目的基因，還可用于定點誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進行兩次PCR，其操作步驟為：
①根據(jù)目的基因序列設(shè)計引物，得到兩個常規(guī)引物，分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物；
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設(shè)計突變上游引物，突變位點位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進行第一次PCR反應(yīng)得到下游大引物；
④用得到的下游大引物中和另一個常規(guī)上游引物進行第二次PCR擴增，得到突變目的基因序列。回答下列問題：
（1）PCR擴增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關(guān)，DNA中G+C的含量越多，要求的變性溫度越高。其原因是。該PCR擴增技術(shù)所需的基本條件是種引物、原料、模板、。
（2）在第一次PCR反應(yīng)中，形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過次復制。第一次PCR的產(chǎn)物DNA的條鏈作為第二次PCR所用的引物。與X射線誘變相比，該突變技術(shù)的優(yōu)點是。
（3）如果要利用微生物進一步克隆PCR定點誘變產(chǎn)物，其步驟包括：、、微生物的篩選和培養(yǎng)、從菌群中獲取更多目的基因。將獲取目的基因和質(zhì)粒進行連接后，需先用處理農(nóng)桿菌以便將基因表達載體導入馬鈴薯細胞，將馬鈴薯細胞培養(yǎng)成幼苗時經(jīng)過的兩個過程是。檢測目的基因是否在馬鈴薯細胞中轉(zhuǎn)錄出了mRNA，所采用的方法是。發(fā)布：2024/12/30 23:0:2組卷：32引用：3難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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