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關(guān)于限制酶的說法中,正確的是( ?。?/h1>

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】B
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/21 8:0:10組卷:14引用:2難度:0.8
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  • 1.RNA沉默是雙鏈RNA被特異性的核酸酶降解,產(chǎn)生小干擾RNA(siRNA),這些siRNA與同源的靶RNA互補(bǔ)結(jié)合,特異降解靶RNA,從而抑制基因表達(dá)。棉蚜是棉花的主要害蟲,嚴(yán)重危害棉花的生產(chǎn)。E基因是棉蚜生長發(fā)育的重要基因,為了控制棉蚜對棉花的危害,科研人員通過轉(zhuǎn)基因技術(shù),在棉花中表達(dá)棉蚜E基因的雙鏈RNA(dsRNA),特異性抑制棉蚜內(nèi)源E基因的表達(dá)。如圖是主要流程,請回答:

    限制酶 識別序列和切點(diǎn)
    EcoRⅠ G↓AATTC
    KpnⅠ G↓GTACC
    BamHⅠ G↓GATCC
    XbaⅠ T↓CTAGA
    菁優(yōu)網(wǎng)
    (1)根據(jù)PCR1反應(yīng)體系中加入的引物1和2推測PCR2中加入的引物為
     
    。
    A.5'-AAATCTAGAAGCGACTCAAGATCATGGAGTAT-3'
    B.5'-AAATCTAGACTGCCACTTCTTCAACTAATTCT-3'
    C.5'-AAAGGATCCAGCGACTCAAGATCATGGAGTAT-3'
    D.5'-AAAGGATCCCTGCCACTTCTTCAACTAATTCT-3'
    (2)從理論上推測,PCR1第五輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物1的DNA片段所占的比例為
     
    。圖中正義序列和反義序列中堿基排列順序
     
    (填“大多數(shù)相同”或“大多數(shù)不同”或“相同”或“不同”)。過程①需要的工具酶除限制酶外還需要
     

    (3)過程②將表達(dá)載體轉(zhuǎn)化到經(jīng)
     
    處理的農(nóng)桿菌菌株后,為了確定重組質(zhì)粒已經(jīng)成功轉(zhuǎn)化可以通過
     
    驗(yàn)證。
    (4)過程④愈傷組織形成棉花植株的過程稱為
     
    。轉(zhuǎn)基因棉花再生植株移栽到溫室后,葉片涂抹
     
    檢測抗性,并提取DNA進(jìn)行PCR分析。
    (5)科研人員采用特定的方法大量提取成功轉(zhuǎn)化的4株棉花植株葉片的基因組DNA,用HindⅢ完全消化,消化產(chǎn)物經(jīng)電泳、轉(zhuǎn)膜后與目的基因的探針雜交,其雜交帶結(jié)果如圖2所示(圖中數(shù)字2~5代表轉(zhuǎn)化成功的植株,數(shù)字1代表對照組)。下列有關(guān)分析正確的有
     
    。
    ①對照組可以用非轉(zhuǎn)基因棉花的基因組DNA進(jìn)行實(shí)驗(yàn)
    ②數(shù)字3所代表的植株中目的基因插入染色中的兩個不同位置
    ③選擇HindⅢ進(jìn)行消化的原因是基因組DNA中一般只有1~2切點(diǎn)
    ④相同位置上雜交帶對應(yīng)DNA片段的脫氧核苷酸序列相同
    (6)科研人員進(jìn)一步鑒定上述4號泳道對應(yīng)的植株,確定獲得一株轉(zhuǎn)基因抗性植株CZ4,CZ4連續(xù)自交兩代,則F2中抗性植株占比為
     
    。

    發(fā)布:2024/10/17 17:0:4組卷:12引用:1難度:0.4
  • 菁優(yōu)網(wǎng)2.某研究小組利用水稻細(xì)胞培育能產(chǎn)生HPV(人乳頭瘤病毒)-L1蛋白的水稻胚乳細(xì)胞生物反應(yīng)器,為獲得HPV-L1蛋白提供一種新的高效、低廉的途徑,用于制備HPV疫苗。其基本流程包括表達(dá)載體的構(gòu)建、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化、水稻細(xì)胞轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)基因植株的篩選等步驟,最終獲得能產(chǎn)生含HPV-L1蛋白胚乳細(xì)胞的轉(zhuǎn)基因水稻。回答下列問題:
    (1)PCR是獲取HPV-L1基因的一種方法,PCR反應(yīng)體系設(shè)計(jì)的兩種引物,在引物間和引物內(nèi)的堿基都不能互補(bǔ),其原因是
     
    。
    (2)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化:科研人員構(gòu)建了如圖所示的表達(dá)載體,將其與經(jīng)過Ca2+處理后的農(nóng)桿菌細(xì)胞混合,隨后將菌液涂布在含
     
    的培養(yǎng)基上培養(yǎng),挑取菌落進(jìn)行PCR鑒定后再擴(kuò)大培養(yǎng)待用。
    (3)水稻細(xì)胞轉(zhuǎn)化:取水稻離體組織置于誘導(dǎo)培養(yǎng)基啟動子潮霉素啟動子抗性基因中發(fā)生
     
    過程形成愈傷組織。挑取生長良好的愈傷組織加入到(2)中得到的菌液中共培養(yǎng),完成轉(zhuǎn)化過程。
    (4)轉(zhuǎn)基因水稻的篩選:將轉(zhuǎn)化處理后的水稻愈傷組織放在含
     
    (抗生素)的培養(yǎng)基中選擇培養(yǎng),并誘導(dǎo)出轉(zhuǎn)基因水稻。
    (5)水稻胚乳生物反應(yīng)器具有提取和處理產(chǎn)物簡易、生產(chǎn)成本低和生物安全性高等特點(diǎn),從而被廣泛應(yīng)用。請?jiān)诜肿铀缴咸岢鰞蓚€提高水稻胚乳生物反應(yīng)器產(chǎn)物產(chǎn)量的思路:
     
    。

    發(fā)布:2024/10/25 0:0:1組卷:5引用:1難度:0.5
  • 菁優(yōu)網(wǎng)3.α-淀粉酶被廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)過程中。為獲得催化活性高的α-淀粉酶,科研人員利用細(xì)菌進(jìn)行改造。
    (1)α-淀粉酶能將
     
    水解為低聚糖和單糖,其催化活性高低往往取決于該酶活性中心的
     
    結(jié)構(gòu)。
    (2)科研人員提取枯草芽孢桿菌的表達(dá)載體,插入大腸桿菌復(fù)制原點(diǎn)以及氨芐青霉素抗性基因,構(gòu)建如圖所示重組穿梭載體。
    ①根據(jù)α-淀粉酶活性中心的氨基酸序列,通過
     
    工程得到α-淀粉酶突變基因。
    ②構(gòu)建圖中所示重組穿梭載體需要的酶是
     
    。插入大腸桿菌復(fù)制原點(diǎn)的目的是
     
    。
    ③將含有α-淀粉酶突變基因的重組穿梭載體導(dǎo)入
     
    的大腸桿菌細(xì)胞中。將大腸桿菌菌液涂布于含
     
    的選擇培養(yǎng)基上,待長出菌落后,用PCR方法檢驗(yàn)成功轉(zhuǎn)化的細(xì)胞。
    (3)培養(yǎng)轉(zhuǎn)化成功的大腸桿菌并從中提取重組穿梭載體,導(dǎo)入枯草芽孢桿菌。將培養(yǎng)得到的枯草桿菌菌液涂布于含淀粉的培養(yǎng)基上,一段時(shí)間后選擇
     
    的菌落,從中可篩選得到催化活性較高的α-淀粉酶。
    (4)請舉一例說明本實(shí)驗(yàn)獲得的催化活性高的α-淀粉酶在生產(chǎn)中的應(yīng)用價(jià)值:
     
    。

    發(fā)布:2024/10/25 17:0:1組卷:13引用:1難度:0.6
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