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二十碳五烯酸(EPA)能促進(jìn)體內(nèi)飽和脂肪酸代謝,是人體自身不能直接合成但又不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。獲取EPA產(chǎn)品的主要途徑是從魚(yú)油等海洋漁業(yè)資源中提取。研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)從海洋細(xì)菌中提取了EPA合成途徑的關(guān)鍵基因pfaB,并將其導(dǎo)入酵母菌內(nèi),通過(guò)酵母菌發(fā)酵生產(chǎn)EPA,相關(guān)過(guò)程如圖所示,請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
菁優(yōu)網(wǎng)
(1)利用PCR擴(kuò)增pfaB基因前,需設(shè)計(jì)引物
①④
①④
(填序號(hào)),在第
輪循環(huán)產(chǎn)物中開(kāi)始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長(zhǎng)的DNA片段(pfaB基因)。
(2)利用PCR擴(kuò)增pfaB基因時(shí),需將溫度上升到90℃后再降溫至50℃,目的是使pfaB基因雙鏈解旋為單鏈后,便于
引物與模板鏈
引物與模板鏈
通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則結(jié)合。將pfaB基因連接在pP1C9質(zhì)粒上時(shí)所用的酶是
DNA連接酶(和限制酶)
DNA連接酶(和限制酶)
。
(3)將pfaB-pP1C9表達(dá)載體導(dǎo)入酵母菌前,需先將表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌并進(jìn)行篩選,篩選時(shí)培養(yǎng)基中應(yīng)加入
氨芐青霉素
氨芐青霉素
,再將含有表達(dá)載體的大腸桿菌與酵母菌置于電轉(zhuǎn)杯中,通過(guò)電激將大腸桿菌導(dǎo)入酵母菌,使該表達(dá)載體進(jìn)入酵母菌細(xì)胞中,且在酵母菌中不會(huì)隨著其繁殖而丟失的原因是,表達(dá)載體上含有
真核
真核
(填“真核”或“原核”)生物復(fù)制原點(diǎn),能在酵母菌中復(fù)制。

【答案】①④;三;引物與模板鏈;DNA連接酶(和限制酶);氨芐青霉素;真核
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書(shū)面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/28 8:51:19組卷:23引用:1難度:0.6
相似題
  • 1.目前,科學(xué)家已在牛和山羊等動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類(lèi)藥物.下列與之相關(guān)的說(shuō)法,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:5引用:1難度:0.9
  • 2.最近,科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長(zhǎng)激素并將其分泌到尿液中.這是繼哺乳動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后,在膀胱生物反應(yīng)器研究上另一進(jìn)展.
    (1)將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫荏w細(xì)胞,常用的方法是
     
    .所使用到儀器是
     

    (2)在基因工程中,將目的基因與運(yùn)載體結(jié)合時(shí),必須用
     
    酶和
     
    酶.常用的運(yùn)載體有
     
    、
     
     
    等,而作為運(yùn)載體必須具備相應(yīng)的條件,例如應(yīng)具有
     
    以便進(jìn)行篩選.進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移時(shí),通常要將外源基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物的
     
    中,原因是
     

    (3)通常采用
     
    技術(shù)檢測(cè)外源基因是否插入了小鼠的基因組中.
    (4)在研究膀胱生物反應(yīng)器時(shí),應(yīng)使外源基因在小鼠的
     
    細(xì)胞中特異性表達(dá).
    (5)如果將藥物蛋白基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物如牛、羊的膀胱上皮細(xì)胞中,從轉(zhuǎn)基因牛、羊尿液中提取藥物比從乳汁中提取藥物的更大優(yōu)越性在于
     

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:3引用:1難度:0.3
  • 3.抗凝血酶是一種天然抗凝血?jiǎng)?,在臨床上被廣泛應(yīng)用。目前科學(xué)家已在豬和羊等動(dòng)物的乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了人的抗凝血酶,如圖是構(gòu)建抗凝血酶基因表達(dá)載體所用的pBR質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及人抗凝血酶基因所在的DNA片段,回答下列問(wèn)題:
    菁優(yōu)網(wǎng)
    (1)現(xiàn)有以下4種引物,引物A15'-GGACCCCGGG-3';引物B:5'-CATTTCTAGA-3';引物C:5'-CCTGGGGCCC-3';引物D:5'-GTAAAGATCT-3';,利用PCR擴(kuò)增獲取抗凝血酶基因,應(yīng)選用引物
     
    (填引物名稱(chēng)),擴(kuò)增產(chǎn)物可選擇限制酶
     
    切割后再利用E?coliDNA連接酶連接到pBR質(zhì)粒上。
    (2)所選用的pBR質(zhì)粒上含有啟動(dòng)子,其作用是
     
    ,將構(gòu)建的基因表達(dá)載體先導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞,然后將大腸桿菌涂布到含新霉素的選擇培養(yǎng)基上,長(zhǎng)出了多個(gè)大腸桿菌菌落,這些菌落并非都是目的菌株,原因是
     
    。
    (3)將篩選得到的目的菌株提取質(zhì)粒,再通過(guò)
     
    方法導(dǎo)入到豬或羊的
     
    細(xì)胞內(nèi),通過(guò)培養(yǎng)即可獲得能表達(dá)人抗凝血酶的乳腺生物反應(yīng)器。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:4引用:1難度:0.6
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