圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度(bp即堿基對)和部分堿基序列,圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列現(xiàn)有Msp I、BamH I、Mbo I、Sma I 4種限制性核酸內(nèi)切酶切割的堿基序列和酶切位點分別為C↓CGG、G↓ GATCC、↓GATC、CCC↓GGG. 請回答下列問題:
(1)若用限制酶Sma I完全切割圖1中DNA片段,其產(chǎn)物長度分別為537bp537bp、790bp790bp、661bp661bp。
(2)若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對被T-A堿基對替換,那么基因D就突變?yōu)榛騞。從隱性純合子分離出圖1及其對應(yīng)的DNA片段,用限制酶Sma I完全切割,產(chǎn)物中共有22種不同DNA片段。為了提高實驗成功率,需要通過PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因,以獲得大量的目的基因。
(3)若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進(jìn)行,形成重組質(zhì)粒,那么應(yīng)選用的限制酶是BamHIBamHI。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后,為了篩選出含質(zhì)粒的大腸桿菌,一般先用添加抗生素B抗生素B的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),然后將生長的菌接種到只含抗生素A抗生素A的培養(yǎng)基中培養(yǎng),可進(jìn)一步篩選出含重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】537bp;790bp;661bp;2;PCR;BamHI;抗生素B;抗生素A
【解答】
【點評】
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