生物工程與技術(shù)
Leber先天性黑朦10型（LCA10）是一種先天性眼科遺傳疾病。該疾病是由于患者控制CEP290蛋白合成的基因在第26堿基處發(fā)生了改變，即插入了一段堿基序列（一段假性編碼基因），結(jié)果導(dǎo)致其編碼的CEP290蛋白變短，致使患者視網(wǎng)膜感光細(xì)胞缺陷，目前還沒有藥物可以治療LCA10。
CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)是一種比較精準(zhǔn)的基因剪刀，它能對(duì)任意DNA進(jìn)行目標(biāo)性的編輯加工（剪切、刪除、位移和增加），因而有可能實(shí)現(xiàn)對(duì)LCA10的治療。據(jù)圖回答下列問題。

（1）根據(jù)材料和圖1分析，CRISPR-Cas9的作用相當(dāng)于基因工程中使用的

限制

限制

酶，圖1中的過(guò)程③需要

DNA連接

DNA連接

酶才能將1和2這兩部分連接在一起。
（2）導(dǎo)致患者視網(wǎng)膜感光細(xì)胞缺陷最根本的原因是

B

B

。
A.基因重組
B.基因突變
C.染色體畸變
D.染色體數(shù)目變異
（3）從CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)特點(diǎn)看，該技術(shù)在

基因治療、動(dòng)植物育種等

基因治療、動(dòng)植物育種等

等方面有較廣闊的應(yīng)用前景（至少寫出兩個(gè)）。
研究人員想通過(guò)基因療法治療該疾病。圖2為應(yīng)用基因編輯及轉(zhuǎn)基因技術(shù)的部分操作流程圖，請(qǐng)結(jié)合材料和所學(xué)的知識(shí)，回答下列問題。
（4）若要從患者細(xì)胞中獲得控制CEP290蛋白合成的基因，需先用

EcoRⅠ和BamHⅠ

EcoRⅠ和BamHⅠ

酶進(jìn)行切割，然后再用

CRISPR-Cas944

CRISPR-Cas944

將假性編碼基因切除。
（5）圖2中表示篩選的過(guò)程是

③

③

（填編號(hào)），篩選所用的培養(yǎng)基中需添加

卡那霉素

卡那霉素

。
（6）篩選所用的培養(yǎng)基滅菌的條件是

C

C

。
A.1.05kg/cm²  62℃30min
B.1.05kg/cm²  100℃30min
C.1.05kg/cm²  121℃30min
D.1.05kp  121℃30min
（7）CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)與轉(zhuǎn)基因技術(shù)相比，最明顯的優(yōu)勢(shì)是

CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)可任意的選擇DNA上的目標(biāo)進(jìn)行切割，目的性更強(qiáng)。選用患者自身的基因進(jìn)行改造，不引入外源基因，安全性更高

CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)可任意的選擇DNA上的目標(biāo)進(jìn)行切割，目的性更強(qiáng)。選用患者自身的基因進(jìn)行改造，不引入外源基因，安全性更高

。