Graves病可導(dǎo)致甲狀腺功能亢進。研究發(fā)現(xiàn),Graves病患者甲狀腺細胞表面表達大量細胞間黏附分子ICAM-1,導(dǎo)致甲狀腺腫大??蒲腥藛T通過制備單克隆抗體,對治療Graves病進行了嘗試,用ICAM-1作為抗原間隔多次免疫若干只小鼠,幾周后取這些免疫小鼠的血清,分別加入多孔培養(yǎng)板的不同孔中,多孔培養(yǎng)板中加入ICAM-1以檢測這些小鼠產(chǎn)生的抗體。依據(jù)反應(yīng)結(jié)果,選出抗原—抗體反應(yīng)最強的培養(yǎng)孔所對應(yīng)的小鼠M。據(jù)此回答下列問題:
(1)取小鼠M脾臟細胞制備成細胞懸液,與實驗用骨髓瘤細胞進行融合,誘導(dǎo)動物細胞融合是方法有PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法。用特定的選擇培養(yǎng)基篩選得到細胞是 雜交瘤雜交瘤細胞,而 未融合的親本細胞和融合的具有同種細胞核的未融合的親本細胞和融合的具有同種細胞核的細胞會死亡。
(2)將實驗獲得的上述細胞在多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng),用抗體檢測,從中選擇 大量產(chǎn)生抗ICAM-1抗體大量產(chǎn)生抗ICAM-1抗體的雜交瘤細胞,便可以在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng),從細胞培養(yǎng)液中獲取大量的單克隆抗體,或?qū)㈦s交瘤細胞 注射到小鼠腹腔中注射到小鼠腹腔中進行克隆化培養(yǎng),一段時間后從小鼠腹水中提取實驗用抗體。
(3)若進一步比較實驗用抗體和131I對Graves病模型小鼠的治療作用,可將若干Graves病模型小鼠等分為三組,請補充以下實驗設(shè)計。
①對照組(A):給Graves病模型小鼠腹腔注射0.1mL無菌生理鹽水
②131I治療組(B):給Graves病模型小鼠腹腔注射溶于0.1mL無菌生理鹽水的131I
③單克隆抗體治療組(C):給Graves病模型小鼠腹腔注射 溶于0.1mL無菌生理鹽水的抗ICAM-1單克隆抗體溶于0.1mL無菌生理鹽水的抗ICAM-1單克隆抗體。
【考點】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法;雜交瘤;未融合的親本細胞和融合的具有同種細胞核的;大量產(chǎn)生抗ICAM-1抗體;注射到小鼠腹腔中;溶于0.1mL無菌生理鹽水的抗ICAM-1單克隆抗體
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:2引用:1難度:0.6
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1.為實現(xiàn)對肝癌的有效治療,研究人員通過比較肝腫瘤細胞和正常細胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點,制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
(1)檢測發(fā)現(xiàn)細胞的CLDN6蛋白能夠促進腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點。CLDN6蛋白是一個跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時,應(yīng)提取
(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達CLDN6細胞和低表達CLDN6細胞,檢測細胞活力,結(jié)果如圖1:
由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達CLDN6細胞,依據(jù)是
(4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達CLDN6細胞的原因是發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6 -
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發(fā)布:2024/12/19 1:0:1組卷:39引用:4難度:0.5 -
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發(fā)布:2024/12/19 6:0:1組卷:42引用:2難度:0.6
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