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人體內(nèi)的t-PA蛋白能高效降解由纖維蛋白凝聚而成的血栓,是心梗和腦血栓的急救藥。通過基因工程技術(shù)可以大量制備基因工程藥物t-PA。研究表明,為心?;颊咦⑸浯罅縯-PA會誘發(fā)顱內(nèi)出血,其原因在于t-PA與纖維蛋白結(jié)合的特異性不高,若將t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸,能顯著降低出血副作用。據(jù)此,先對天然的t-PA基因進行序列改造,然后再采取傳統(tǒng)的基因工程方法表達該改造后的基因,可制造出性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白。(注:如圖表示相關(guān)的目的基因、載體及限制酶。pCLY11為質(zhì)粒,新霉素為抗生素。)請回答下列問題:
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(1)以上制造出性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白的過程被稱為
蛋白質(zhì)工程
蛋白質(zhì)工程
。已知人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板鏈堿基序列為ACA,而絲氨酸的密碼子為UCU,因此改造后的基因決定第84位絲氨酸的模板鏈的堿基序列應(yīng)設(shè)計為
AGA
AGA
。
(2)如圖所示,需選用限制酶
XmaⅠ和BgⅡ
XmaⅠ和BgⅡ
切開質(zhì)粒pCLY11,才能與t-PA改良基因高效連接。與單一酶酶切相比,本操作采用的雙酶切方法的優(yōu)點是
防止質(zhì)粒載體和目的基因的自身環(huán)化,保證質(zhì)粒載體和目的基因的正確連接
防止質(zhì)粒載體和目的基因的自身環(huán)化,保證質(zhì)粒載體和目的基因的正確連接
。
(3)將連接好的DNA分子導(dǎo)入大腸桿菌,含t-PA改良基因重組DNA分子的細胞應(yīng)具有的性狀是
C
C
。
A.新霉素抗性且呈藍色
B.新霉素敏感且呈藍色
C.新霉素抗性且呈白色
D.新霉素敏感且呈白色

【答案】蛋白質(zhì)工程;AGA;XmaⅠ和BgⅡ;防止質(zhì)粒載體和目的基因的自身環(huán)化,保證質(zhì)粒載體和目的基因的正確連接;C
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/5/1 8:0:8組卷:4引用:1難度:0.6
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  • 1.某種結(jié)腸癌細胞存在抑癌基因A的突變,研究人員準備利用DNA重組技術(shù)將突變的抑癌基因A克隆到質(zhì)粒載體上,用于后續(xù)癌癥發(fā)生機制和癌癥治療的研究。下列說法正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/10/28 10:30:1組卷:5引用:2難度:0.7
  • 2.最近,科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并將其分泌到尿液中.這是繼哺乳動物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后,在膀胱生物反應(yīng)器研究上另一進展.
    (1)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫荏w細胞,常用的方法是
     
    .所使用到儀器是
     

    (2)在基因工程中,將目的基因與運載體結(jié)合時,必須用
     
    酶和
     
    酶.常用的運載體有
     
    、
     
     
    等,而作為運載體必須具備相應(yīng)的條件,例如應(yīng)具有
     
    以便進行篩選.進行基因轉(zhuǎn)移時,通常要將外源基因轉(zhuǎn)入動物的
     
    中,原因是
     

    (3)通常采用
     
    技術(shù)檢測外源基因是否插入了小鼠的基因組中.
    (4)在研究膀胱生物反應(yīng)器時,應(yīng)使外源基因在小鼠的
     
    細胞中特異性表達.
    (5)如果將藥物蛋白基因轉(zhuǎn)入動物如牛、羊的膀胱上皮細胞中,從轉(zhuǎn)基因牛、羊尿液中提取藥物比從乳汁中提取藥物的更大優(yōu)越性在于
     

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:3引用:1難度:0.3
  • 3.抗凝血酶是一種天然抗凝血劑,在臨床上被廣泛應(yīng)用。目前科學(xué)家已在豬和羊等動物的乳腺生物反應(yīng)器中表達出了人的抗凝血酶,如圖是構(gòu)建抗凝血酶基因表達載體所用的pBR質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及人抗凝血酶基因所在的DNA片段,回答下列問題:
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    (1)現(xiàn)有以下4種引物,引物A15'-GGACCCCGGG-3';引物B:5'-CATTTCTAGA-3';引物C:5'-CCTGGGGCCC-3';引物D:5'-GTAAAGATCT-3';,利用PCR擴增獲取抗凝血酶基因,應(yīng)選用引物
     
    (填引物名稱),擴增產(chǎn)物可選擇限制酶
     
    切割后再利用E?coliDNA連接酶連接到pBR質(zhì)粒上。
    (2)所選用的pBR質(zhì)粒上含有啟動子,其作用是
     
    ,將構(gòu)建的基因表達載體先導(dǎo)入大腸桿菌細胞,然后將大腸桿菌涂布到含新霉素的選擇培養(yǎng)基上,長出了多個大腸桿菌菌落,這些菌落并非都是目的菌株,原因是
     

    (3)將篩選得到的目的菌株提取質(zhì)粒,再通過
     
    方法導(dǎo)入到豬或羊的
     
    細胞內(nèi),通過培養(yǎng)即可獲得能表達人抗凝血酶的乳腺生物反應(yīng)器。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:4引用:1難度:0.6
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