人體內(nèi)的t-PA蛋白能高效降解由纖維蛋白凝聚而成的血栓,是心梗和腦血栓的急救藥。通過(guò)基因工程技術(shù)可以大量制備基因工程藥物t-PA。研究表明,為心?;颊咦⑸浯罅縯-PA會(huì)誘發(fā)顱內(nèi)出血,其原因在于t-PA與纖維蛋白結(jié)合的特異性不高,若將t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸,能顯著降低出血副作用。據(jù)此,先對(duì)天然的t-PA基因進(jìn)行序列改造,然后再采取傳統(tǒng)的基因工程方法表達(dá)該改造后的基因,可制造出性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白。(注:如圖表示相關(guān)的目的基因、載體及限制酶。pCLY11為質(zhì)粒,新霉素為抗生素。)請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)以上制造出性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白的過(guò)程被稱為 蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程。已知人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板鏈堿基序列為ACA,而絲氨酸的密碼子為UCU,因此改造后的基因決定第84位絲氨酸的模板鏈的堿基序列應(yīng)設(shè)計(jì)為 AGAAGA。
(2)如圖所示,需選用限制酶 XmaⅠ和BgⅡXmaⅠ和BgⅡ切開(kāi)質(zhì)粒pCLY11,才能與t-PA改良基因高效連接。與單一酶酶切相比,本操作采用的雙酶切方法的優(yōu)點(diǎn)是 防止質(zhì)粒載體和目的基因的自身環(huán)化,保證質(zhì)粒載體和目的基因的正確連接防止質(zhì)粒載體和目的基因的自身環(huán)化,保證質(zhì)粒載體和目的基因的正確連接。
(3)將連接好的DNA分子導(dǎo)入大腸桿菌,含t-PA改良基因重組DNA分子的細(xì)胞應(yīng)具有的性狀是 CC。
A.新霉素抗性且呈藍(lán)色
B.新霉素敏感且呈藍(lán)色
C.新霉素抗性且呈白色
D.新霉素敏感且呈白色
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】蛋白質(zhì)工程;AGA;XmaⅠ和BgⅡ;防止質(zhì)粒載體和目的基因的自身環(huán)化,保證質(zhì)粒載體和目的基因的正確連接;C
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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