新冠病毒（+RNA）的刺突蛋白S通過與人體黏膜細胞表面的ACE2受體結合而進入細胞，是宿主抗體的重要作用位點。如圖1是科研人員利用新冠病毒的+RNA提取S蛋白基因和S蛋白受體結合域RBD基因作為抗原基因序列，研制新冠病毒雙抗原疫苗的技術路線。已知PCR1與PCR2要分別進行，然后將產物混合，使用引物1和引物4進行PCR3，最終獲得大量S-RBD融合基因（1500bp）。
（1）PCR3過程中，片段1與片段2連接形成S-RBD融合基因，需要使用 耐高溫的DNA聚合耐高溫的DNA聚合酶。為使S-RBD融合基因能與pX質粒相連接，并在工程菌中表達時先合成S蛋白，則PCR1過程中，應在引物1的5′端添加的限制酶序列是 5′CATATG3′5′CATATG3′。
（2）為初步檢測過程B構建是否成功，用EcoRⅠ、NdeⅠ、HindⅢ對重組pX系列質粒進行完全酶切，然后對重組pX系列質粒及其酶切產物進行凝膠電泳檢測，結果如圖2。據圖可知，重組質粒pX2和pX5構建成功的依據是 重組質粒pX2和pX5酶切后形成的1000bp和500bp片段堿基對總和等于S—RBD融合基因長度1500bp重組質粒pX2和pX5酶切后形成的1000bp和500bp片段堿基對總和等于S—RBD融合基因長度1500bp。
（3）在工程菌的篩選時，可先后用兩種抗生素進行影印培養(yǎng)實驗（即使用無菌的絨氈布壓在培養(yǎng)基A的菌落上，帶出少許菌種，平移并壓在培養(yǎng)基B上），在培養(yǎng)基B中存活的菌落是否含有目的基因 否否（填“是”或“否”）。鑒定重組pX質粒是否導入工程菌還可以采用的方法是 觀察菌落是否具有熒光觀察菌落是否具有熒光。
（4）試從免疫學角度分析此種雙抗原疫苗比常規(guī)S蛋白疫苗更具優(yōu)勢的原因 此種雙抗原疫苗含有S蛋白受體結合域RBD，有利于進入靶細胞，從而激發(fā)細胞免疫此種雙抗原疫苗含有S蛋白受體結合域RBD，有利于進入靶細胞，從而激發(fā)細胞免疫。
【考點】基因工程的操作過程綜合；DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】耐高溫的DNA聚合；5′CATATG3′；重組質粒pX2和pX5酶切后形成的1000bp和500bp片段堿基對總和等于S—RBD融合基因長度1500bp；否；觀察菌落是否具有熒光；此種雙抗原疫苗含有S蛋白受體結合域RBD，有利于進入靶細胞，從而激發(fā)細胞免疫
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/10/26 12:30:1組卷：15引用：3難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7