基因工程自20世紀70年代興起后,在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等方面,展示出廣闊的前景。如圖是通過基因工程獲得轉(zhuǎn)基因生物或產(chǎn)品的流程圖,請結(jié)合相關(guān)知識回答下列問題:
(1)轉(zhuǎn)基因生物反應(yīng)器是指利用基因工程技術(shù)手段將外源基因轉(zhuǎn)化到受體中進行高效表達,從而獲得具有重要應(yīng)用價值的表達產(chǎn)物的生命系統(tǒng),包括轉(zhuǎn)基因動物、轉(zhuǎn)基因植物和轉(zhuǎn)基因微生物。
①若利用圖示流程構(gòu)建小鼠乳腺生物反應(yīng)器批量生產(chǎn)人生長激素,應(yīng)先從人體 垂體垂體細胞中獲取總RNA,通過 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA,再PCR后獲得生長激素基因。一條單鏈cDNA在PCR儀中進行n次循環(huán),需要消耗 2n-12n-1個引物。構(gòu)建的表達載體導(dǎo)入的受體細胞是 受精卵受精卵。膀胱反應(yīng)器有著和乳腺反應(yīng)器一樣的優(yōu)點:收集產(chǎn)物蛋白比較容易,不會對動物造成傷害。此外膀胱生物反應(yīng)器還具有的顯著優(yōu)勢在于不受轉(zhuǎn)基因動物的 性別、年齡性別、年齡的限制,而且從尿中提取蛋白質(zhì)比在乳汁中提取簡便、高效。
②若圖中的受體細胞是大腸桿菌,通常用 Ca2+Ca2+ 處理大腸桿菌,其目的是使大腸桿菌處于感受態(tài)。理論上制備能分泌生長激素的“工程菌株”時,酵母菌比大腸桿菌更適合作為受體細胞,從細胞結(jié)構(gòu)與功能的角度分析,原因是 酵母菌是真核生物,具有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體,可對蛋白質(zhì)加工并分泌到細胞外,便于提取酵母菌是真核生物,具有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體,可對蛋白質(zhì)加工并分泌到細胞外,便于提取。
(2)全球新冠疫情形勢依然非常嚴峻,新冠病毒疫苗的研制和新冠病毒的快速檢測的研究均已有所突破。
①目前新冠疫苗有滅活疫苗、基因疫苗、蛋白疫苗等。利用圖示流程制備新冠病毒S蛋白疫苗。圖中質(zhì)粒A上m、n分別是啟動子和終止子,箭頭處是限制酶的切點(NcoⅠ:5′-C↓CATGG-3′;NheⅠ:5′-G↓GATCC-3′),根據(jù)S蛋白的RNA制備的目的基因S無法與載體A連接,需要在S基因兩側(cè)加接末端,若b鏈處加接末端5′-GATC,則在a鏈處加接末端5′-CATGCATG。
②利用單克隆抗體制備技術(shù)制備試劑盒中的抗體1。先給小鼠注射純化的N抗原蛋白,一段時間后,從小鼠的 脾臟脾臟(免疫器官)中獲取已免疫的B淋巴細胞,將獲得的細胞與骨髓瘤細胞融合,再經(jīng)過選擇培養(yǎng)基篩選、克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測,獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞,再經(jīng)體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng),最終獲得抗N抗原蛋白的單克隆抗體。
【答案】垂體;逆轉(zhuǎn)錄;2n-1;受精卵;性別、年齡;Ca2+;酵母菌是真核生物,具有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體,可對蛋白質(zhì)加工并分泌到細胞外,便于提??;CATG;脾臟;克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測
【解答】
【點評】
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