類病斑突變體是一類在沒有外界病原菌侵染情況下,局部組織自發(fā)形成壞死斑的突變體,壞死斑的產(chǎn)生基本不影響植株生長,反而會增強(qiáng)植株對病原菌抗性。
(1)將某野生型粳稻品種用甲基磺酸乙酯(EMS)誘變誘變獲得類病斑突變體,收獲突變體種子,在溫室內(nèi)種植,隨著葉片發(fā)育逐漸出現(xiàn)病斑直至布滿葉片,收獲種子,連續(xù)多年種植,其葉片均產(chǎn)生類病斑,表明該類病斑表型可以穩(wěn)定遺傳穩(wěn)定遺傳。
(2)突變體與野生型植株正、反交正、反交產(chǎn)生的F1植株表型均與生型一致,且F2中野生型和突變型植株的比例符合3:1.表明突變體的類病斑表型受常染色體上的1對隱性基因1對隱性基因控制。
(3)對F2群體中148個隱性單株和野生型植株野生型植株進(jìn)行序列分析,發(fā)現(xiàn)1號染色體上A基因的非模板鏈發(fā)生了單堿基突變,如圖1所示,據(jù)此推測突變體出現(xiàn)類病斑的原因是:非模板鏈的G變?yōu)門,使密碼子由GAA變?yōu)閁AA,翻譯提前終止,合成的多肽鏈變短非模板鏈的G變?yōu)門,使密碼子由GAA變?yōu)閁AA,翻譯提前終止,合成的多肽鏈變短。
(可能用到的密碼子:AUG:起始密碼子;CAA:谷氨酰胺;GAA:谷氨酸;CUU:亮氨酸;UAA:終止密碼子;AUU:異亮氨酸)
(4)進(jìn)一步實驗發(fā)現(xiàn),與野生型相比,類病斑突變體對稻瘟病和白葉枯病的抗性均有所提高。提取細(xì)胞中的總RNA,在逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成cDNA,然后以防御反應(yīng)相關(guān)基因P1、P2、P3的特有序列作引物引物進(jìn)行定量PCR,檢測這三種基因的表達(dá)量,結(jié)果如圖2所示。推測突變體抗性提高的原因是A基因的突變提高了防御基因的表達(dá)A基因的突變提高了防御基因的表達(dá)。
【答案】誘變;穩(wěn)定遺傳;正、反交;1對隱性基因;野生型植株;非模板鏈的G變?yōu)門,使密碼子由GAA變?yōu)閁AA,翻譯提前終止,合成的多肽鏈變短;逆轉(zhuǎn)錄;引物;A基因的突變提高了防御基因的表達(dá)
【解答】
【點評】
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