中國科學(xué)家運用合成生物學(xué)方法構(gòu)建了一株嗜鹽單胞菌H,以糖素(甘蔗榨糖后的廢棄液,含較多蔗糖)為原料,在實驗室發(fā)酵生產(chǎn)PHA等新型高附加值可降解材料,期望提高甘蔗的整體利用價值。工藝流程如圖所示?;卮鹣铝袉栴}:
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(1)在選種時,需要以蔗糖作為唯一碳源,并不斷提高其濃度進行多代培養(yǎng)選擇,其目的是
篩選出對蔗糖的耐受能力和利用效率高的嗜鹽單胞菌H
篩選出對蔗糖的耐受能力和利用效率高的嗜鹽單胞菌H
。從功能上看,所用培養(yǎng)基為
選擇培養(yǎng)基
選擇培養(yǎng)基
。
(2)基于菌株H嗜鹽、酸堿耐受能力強等特性,研究人員設(shè)計了一種不需要滅菌的發(fā)酵系統(tǒng),其培養(yǎng)基鹽濃度設(shè)為60g/L、pH為10,菌株H可正常持續(xù)發(fā)酵60d以上,該系統(tǒng)不需要滅菌的原因是
鹽濃度為60g/L的條件下,其他雜菌因失水過多而死亡;pH為10的條件下,其他雜菌的酶變性失活,生長繁殖受抑制
鹽濃度為60g/L的條件下,其他雜菌因失水過多而死亡;pH為10的條件下,其他雜菌的酶變性失活,生長繁殖受抑制
。
(3)培養(yǎng)過程中常采用稀釋涂布平板法對樣品中的活菌進行接種和計數(shù),以評估菌株增殖狀況。采用該方法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目要少,原因是
當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落
當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落
。
(4)該生產(chǎn)技術(shù)的中心環(huán)節(jié)是
發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵
發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵
。該過程需要嚴(yán)格控制
溫度、pH
溫度、pH
等條件(答出兩點即可)。若發(fā)酵產(chǎn)品是單細胞本身,則往往采用
過濾、沉淀
過濾、沉淀
等方法將其分離和干燥即可獲得產(chǎn)品。