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大腸菌群是指一類在35~37℃條件下培養(yǎng)48 h,能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌的總稱,大腸桿菌屬于大腸菌群的一種。我國《生活飲用水衛(wèi)生標準》中關(guān)于生活飲用水的細菌標準是:一、細菌總數(shù)1 mL水中不超過100個;二、大腸桿菌數(shù)1 L水中不超過3個。國標一般采用多管發(fā)酵法檢測樣品中大腸菌群數(shù),具體分為三步:
蛋白胨 10.0
牛肉膏 3.0
乳糖 5.0
氯化鈉 5.0
pH 7.3±0.2
H2O 定容至1000 mL
①初發(fā)酵試驗:將待測樣品稀釋后,選擇3個稀釋度,每個稀釋度分別接種到5支發(fā)酵管中,37℃培養(yǎng)48 h,觀察是否產(chǎn)氣。
②平板分離:將產(chǎn)氣發(fā)酵管中的菌液分別接種于伊紅美藍培養(yǎng)基(生長在此培養(yǎng)基上的大腸菌群呈深紫色,有金屬光澤)上,置于37℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)24h,觀察菌落形態(tài)。
③復(fù)發(fā)酵試驗:挑取平板上呈深紫色,有金屬光澤的菌落,進行染色鏡檢。將鏡檢為革蘭氏陰性無芽孢桿菌的菌株重復(fù)初步發(fā)酵試驗。最后根據(jù)證實為大腸桿菌陽性的管數(shù),按統(tǒng)計學(xué)原理即可得出大腸菌群數(shù)(每升或每100 毫升中的個數(shù))。
(1)初發(fā)酵乳糖蛋白胨培養(yǎng)基配方(g/L)如表所示,按物理性質(zhì)分類,乳糖蛋白胨培養(yǎng)基屬于
液體
液體
培養(yǎng)基,其中的碳源有
牛肉膏、乳糖
牛肉膏、乳糖
。
(2)若檢測飲用水中的大腸桿菌數(shù),則①步驟無須稀釋,原因
飲用水中大腸桿菌數(shù)非常少
飲用水中大腸桿菌數(shù)非常少
,①步 驟每個稀釋度分別接種到5支發(fā)酵管中的原因是
平行重復(fù)實驗,減小實驗誤差
平行重復(fù)實驗,減小實驗誤差
。
(3)②步驟中不能直接用涂布器把菌液涂布在平板上進行大腸菌群計數(shù),原因是
初發(fā)酵過程擴大了大腸菌群的數(shù)量,若使用涂布法可能由于菌液中細菌數(shù)目過多得不到單菌落
初發(fā)酵過程擴大了大腸菌群的數(shù)量,若使用涂布法可能由于菌液中細菌數(shù)目過多得不到單菌落
。
(4)伊紅美藍培養(yǎng)基在配制后通常用
高壓蒸汽滅菌
高壓蒸汽滅菌
法進行滅菌,③步驟中只能挑取符合特征的菌落其中的一小部分進行鏡檢,這是因為
鏡檢為革蘭氏陰性無芽孢桿菌的菌株還需重復(fù)初步發(fā)酵試驗,而鏡檢的菌株因為雜菌污染無法使用
鏡檢為革蘭氏陰性無芽孢桿菌的菌株還需重復(fù)初步發(fā)酵試驗,而鏡檢的菌株因為雜菌污染無法使用

【答案】液體;牛肉膏、乳糖;飲用水中大腸桿菌數(shù)非常少;平行重復(fù)實驗,減小實驗誤差;初發(fā)酵過程擴大了大腸菌群的數(shù)量,若使用涂布法可能由于菌液中細菌數(shù)目過多得不到單菌落;高壓蒸汽滅菌;鏡檢為革蘭氏陰性無芽孢桿菌的菌株還需重復(fù)初步發(fā)酵試驗,而鏡檢的菌株因為雜菌污染無法使用
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:4引用:2難度:0.7
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    發(fā)布:2024/12/31 3:0:2組卷:3引用:3難度:0.7
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