科研人員利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對(duì)干擾素基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療。其技術(shù)流程如圖一：

（1）步驟①中，在核移植前應(yīng)去除卵母細(xì)胞的

細(xì)胞核

細(xì)胞核

，供核的細(xì)胞通常選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，其原因是

十代以內(nèi)的細(xì)胞能保持正常的二倍體核型

十代以內(nèi)的細(xì)胞能保持正常的二倍體核型

。
（2）獲取ES細(xì)胞的來源有

早期胚胎或原始性腺

早期胚胎或原始性腺

。
（3）步驟③中，需要構(gòu)建含有干擾素基因的

基因表達(dá)載體

基因表達(dá)載體

。構(gòu)建前利用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因時(shí)，可以從如圖二A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選取

B和C

B和C

作為引物。對(duì)干擾素基因片段和質(zhì)粒進(jìn)行酶切時(shí)，可選用限制酶的組合為

HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ

HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ

。

（4）將步驟③獲得的ES細(xì)胞在熒光顯微鏡下觀察，選擇發(fā)

綠

綠

色熒光的細(xì)胞進(jìn)行體外誘導(dǎo)。為檢測干擾素基因是否表達(dá)，可以采用

抗原-抗體雜交

抗原-抗體雜交

的方法。
（5）科學(xué)家正在通過蛋白質(zhì)工程技術(shù)將干擾素分子中的一個(gè)半胱氨酸變成絲氨酸，就可以在不影響其活性的前提下延長其保存周期。這項(xiàng)技術(shù)是以

蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系

蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系

為基礎(chǔ)而進(jìn)行的操作。