為使甘藍(lán)具有抗除草劑能力，科研人員將除草劑草甘膦抗性基因轉(zhuǎn)入甘藍(lán)植株，獲得抗草甘膦轉(zhuǎn)基因甘藍(lán)。
（1）草甘膦抗性基因一條鏈的兩端序列如圖2，采用PCR技術(shù)獲取和擴(kuò)增草甘膦抗性基因，應(yīng)選用的引物組合為 AA。
A．5′-CTTGGATGAT-3′和5′-TCTGTTGAAT-3′
B．5′-CTTGGATGAT-3′和5′-TAAGTTGTCT-3′
C．5′-ATTCAACAGA-3′和5′-ATCATCCAAG-3′
D．5′-ATTCAACAGA-3′和5′-GAACCTACTA-3′
（2）基因工程中最核心的步驟是 ①①（填數(shù)字編號(hào)），其目的是 使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并可以遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并可以遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。
（3）步驟②用 Ca2+Ca2+處理農(nóng)桿菌后獲得感受態(tài)細(xì)胞，以便將重組質(zhì)粒導(dǎo)入。步驟③將農(nóng)桿菌與甘藍(lán)愈傷組織共培養(yǎng)后，在步驟④的培養(yǎng)基中添加 潮霉素潮霉素以便篩選出含目的基因的甘藍(lán)植株。
（4）若目的基因用BamHⅠ和BglⅡ剪切，質(zhì)粒用BamHⅠ剪切，酶切后的目的基因存在正向與反向兩種連接方式，可用 BamHI和EcoRIBamHI和EcoRI酶對(duì)兩種重組質(zhì)粒進(jìn)行剪切，通過(guò)凝膠電泳分析產(chǎn)物大小進(jìn)行區(qū)分，如圖3所示，圖中 樣品2樣品2（樣品1/樣品2）為所需基因表達(dá)載體。
| 限制酶 | 識(shí)別序列和切割位點(diǎn) |
| BamHⅠ | -G′GATCC- |
| BglⅡ | -A′GATCT- |
| EcoRⅠ | -G′AATTC- |
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】A；①；使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并可以遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用；Ca2+；潮霉素；BamHI和EcoRI；樣品2
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/5/22 8:0:8組卷：9引用：2難度：0.5
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過(guò)程（填序號(hào)）。過(guò)程②③采用的方法是。
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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