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近年來,生物柴油作為新型能源已經(jīng)成為世界上應(yīng)用最廣泛、發(fā)展迅猛的可再生能源之一。研究人員利用基因工程的方法將油料作物紫蘇DGATI基因?qū)胨奈矕旁澹ú僮鬟^程如圖),獲得轉(zhuǎn)基因的產(chǎn)油微藻,并利用地?zé)釓U水培養(yǎng),不僅能生產(chǎn)生物柴油,還能治理地?zé)釓U水。

注:Lac2基因可使細(xì)菌利用加入培養(yǎng)基的物質(zhì)X-gal,從而使菌落顯現(xiàn)出藍色。若無該基因或該基因被破壞,則菌落則呈白色。
(1)提取紫蘇細(xì)胞的總RNA經(jīng)過
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
得到的cDNA,經(jīng)
PCR
PCR
技術(shù)擴增得到DGAT1基因,與克隆質(zhì)粒pMD19連接,將連接產(chǎn)物導(dǎo)入到經(jīng)CaCl2處理后的大腸桿菌細(xì)胞,并接種到添加
氨芐青霉素
氨芐青霉素
的培養(yǎng)基上培養(yǎng),一段時間后,挑選顏色為
白色
白色
的菌落用液體培養(yǎng)基培養(yǎng),提取質(zhì)粒pMD19-DGAT1。
(2)用限制酶切pMD19-DGAT1獲得DGAT1基因,并與酶切后的載體pBI121連接得到
重組表達載體
重組表達載體
,并導(dǎo)入到四尾柵藻。
(3)轉(zhuǎn)DGATI基因四尾柵藻成功的標(biāo)志是
油脂
油脂
。研究人員利用地?zé)釓U水培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻并檢測其油脂含量,結(jié)果如圖2。
結(jié)果顯示:
轉(zhuǎn)DGATI基因的四尾柵藻油脂含量顯著高于非轉(zhuǎn)基因組
轉(zhuǎn)DGATI基因的四尾柵藻油脂含量顯著高于非轉(zhuǎn)基因組

(4)為檢測轉(zhuǎn)基因四尾柵藻對地?zé)釓U水的去污能力,研究人員設(shè)計實驗并得到相應(yīng)實驗結(jié)果如表。
培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻的地?zé)釓U水各項指標(biāo)總定結(jié)果
各項指標(biāo) 總氮(mg/L) 總磷(mg/L) 氧化物(mg/L)
廢水培養(yǎng)基 23.2 4.32 4.56
培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后 1.9 0.45 0.84
該實驗不能說明轉(zhuǎn)DGATI基因顯著提高了四尾柵藻的去污能力。請寫出進一步完善實驗設(shè)計的思路
應(yīng)添加對照組:廢水培養(yǎng)非轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后,檢測總氮、總磷和氟化物的含量
應(yīng)添加對照組:廢水培養(yǎng)非轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后,檢測總氮、總磷和氟化物的含量
。

【答案】逆轉(zhuǎn)錄;PCR;氨芐青霉素;白色;重組表達載體;油脂;轉(zhuǎn)DGATI基因的四尾柵藻油脂含量顯著高于非轉(zhuǎn)基因組;應(yīng)添加對照組:廢水培養(yǎng)非轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后,檢測總氮、總磷和氟化物的含量
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/5 8:0:7組卷:4引用:1難度:0.5
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    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
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  • 3.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
     
     

    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     

    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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