Ⅰ型糖尿病是因免疫系統(tǒng)將自身胰島素作為抗原識別而引起的自身免疫病。小腸黏膜長期少量吸收胰島素抗原,能誘導免疫系統(tǒng)識別該抗原后應(yīng)答減弱,從而緩解癥狀??蒲腥藛T利用Ⅰ型糖尿病模型小鼠進行動物實驗,使乳酸菌在小鼠腸道內(nèi)持續(xù)產(chǎn)生人胰島素抗原,為此構(gòu)建重組表達載體,技術(shù)路線如圖1。
據(jù)圖回答:
(1)為使人胰島素在乳酸菌中高效表達,需改造其編碼序列。如圖2是改造前后人胰島素B鏈編碼序列的起始30個核苷酸序列。據(jù)圖分析,轉(zhuǎn)錄形成的mRNA中,該段序列所對應(yīng)的片段內(nèi)存在堿基替換的密碼子數(shù)有 66個。
(2)在人胰島素A、B肽鏈編碼序列間引入一段短肽編碼序列,確保等比例表達A、B肽鏈。下列有關(guān)分析正確的是 ABCDABCD(多選)。
A.引入短肽編碼序列不能含終止子序列
B.引入短肽編碼序列不能含終止密碼子編碼序列
C.引入短肽不能改變A鏈氨基酸序列
D.引入短肽不能改變原人胰島素抗原性
(3)在重組表達載體中,SacⅠ和XbaⅠ限制酶僅有圖示的酶切位點。用這兩種酶充分酶切重組表達載體,可形成 33種DNA片段。
(4)檢測轉(zhuǎn)化的乳酸菌發(fā)現(xiàn),信號肽-重組人胰島素分布在細胞壁上。由此推測,信號肽的合成和運輸所經(jīng)歷的細胞結(jié)構(gòu)依次是 核糖體、細胞質(zhì)基質(zhì)、細胞膜、細胞壁核糖體、細胞質(zhì)基質(zhì)、細胞膜、細胞壁。
(5)用轉(zhuǎn)化的乳酸菌飼喂Ⅰ型糖尿病模型小鼠一段時間后,小鼠體內(nèi)出現(xiàn)人胰島素抗原,能夠特異性識別它的免疫細胞有 ABAB(多選)。
A.B細胞
B.T細胞
C.吞噬細胞
D.漿細胞
【答案】6;ABCD;3;核糖體、細胞質(zhì)基質(zhì)、細胞膜、細胞壁;AB
【解答】
【點評】
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