乳酸菌耐酸能力對(duì)菌株自身生長(zhǎng)、在人體胃腸道微環(huán)境中發(fā)揮益生作用至關(guān)重要。
（1）乳酸菌通過(guò)呼吸作用在 細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞質(zhì)中合成乳酸，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)和生存環(huán)境pH逐步降低，抑制細(xì)胞生長(zhǎng)。
（2）為探究乳酸菌的耐酸機(jī)制，研究者進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：
①將乳酸菌在不同pH的液體培養(yǎng)基中37℃靜置厭氧培養(yǎng)，并在0min、30min、60min 分別取樣，采用 稀釋涂布平板稀釋涂布平板法進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，結(jié)果如圖1所示。
酸耐受反應(yīng)是乳酸菌應(yīng)對(duì)酸脅迫時(shí)在細(xì)胞代謝等方面發(fā)生的適應(yīng)性變化，是一種自我保護(hù)機(jī)制。根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，初步選擇酸耐受反應(yīng)的脅迫條件為pH5.0，依據(jù)是 乳酸菌存活率不增不減乳酸菌存活率不增不減。為進(jìn)一步確定，研究者在pH6.5和5.0條件下
培養(yǎng)乳酸菌，然后進(jìn)行pH3.7酸致死處理后統(tǒng)計(jì)存活率，若 與pH6.5組相比，pH5.0組乳酸菌的存活率明顯提高與pH6.5組相比，pH5.0組乳酸菌的存活率明顯提高，則可確定酸耐受反應(yīng)的脅迫條件為pH5.0。
②研究者發(fā)現(xiàn)，經(jīng)酸脅迫后，乳酸菌的hpk基因表達(dá)上調(diào)。為研究hpk基因的功能，利用S質(zhì)粒構(gòu)建hpk基因突變
的乳酸菌菌株。S質(zhì)粒上有紅霉素抗性基因，但是S質(zhì)粒不能在宿主細(xì)胞中復(fù)制，只有交換到宿主DNA上才能傳
代。請(qǐng)從下列各項(xiàng)中選擇正確的實(shí)驗(yàn)步驟并進(jìn)行排序 BFAEBFAE。
A.轉(zhuǎn)化乳酸菌
B.根據(jù)hpk基因的序列信息獲得部分片段缺失的hpk
C.根據(jù)hpk基因的序列信息獲得完整的hpk
D.將不同的乳酸菌涂布在含乳酸的固體培養(yǎng)基上靜置培養(yǎng)
E.將不同的乳酸菌涂布在含紅霉素的固體培養(yǎng)基上靜置培養(yǎng)
F.將目的基因與S質(zhì)粒連接構(gòu)建重組S質(zhì)粒
從上述培養(yǎng)基上初步篩選出來(lái)的單菌落中提取細(xì)菌基因組DNAPCR特異擴(kuò)增紅霉素抗性基因后電泳，結(jié)果如圖2。據(jù)圖可知，樣品6樣品6是對(duì)紅霉素有一定耐受能力的乳酸菌，而不是目標(biāo)轉(zhuǎn)化菌。
（3）為驗(yàn)證hpk突變體的耐酸能力，應(yīng)對(duì)野生乳酸菌和突變體進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)處理和預(yù)期的結(jié)果是 實(shí)驗(yàn)處理：分別先pH5.0培養(yǎng)后置于pH3.7的培養(yǎng)液中。預(yù)期結(jié)果：突變體的存活率明顯低于野生型實(shí)驗(yàn)處理：分別先pH5.0培養(yǎng)后置于pH3.7的培養(yǎng)液中。預(yù)期結(jié)果：突變體的存活率明顯低于野生型。
【答案】細(xì)胞質(zhì)；稀釋涂布平板；乳酸菌存活率不增不減；與pH6.5組相比，pH5.0組乳酸菌的存活率明顯提高；BFAE；樣品6；實(shí)驗(yàn)處理：分別先pH5.0培養(yǎng)后置于pH3.7的培養(yǎng)液中。預(yù)期結(jié)果：突變體的存活率明顯低于野生型
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書(shū)面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：41引用：1難度：0.5
相似題
-
1．丙草胺（C15H22ClNO2）是一種廣泛應(yīng)用的除草劑，能抑制土壤細(xì)菌、放線菌和真菌的生長(zhǎng)。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細(xì)菌菌株，并對(duì)其計(jì)數(shù)（如圖所示），以期為修復(fù)污染土壤提供微生物資源。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/31 4:0:1組卷：17引用：3難度：0.7 -
2．回答下列關(guān)于微生物的問(wèn)題．
阿拉伯膠是一種多糖，研究者從某地合歡樹(shù)下距離地表深10～15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01，以下為該菌株的鑒定過(guò)程．
（1）為獲得單菌落，可采用平板劃線法或法將初篩菌液接種在培養(yǎng)基上．46SM01菌落為粉白色，初期呈突起絮狀，在顯微鏡下觀察到，菌絲白色致密，且有分生孢子，細(xì)胞核直徑約1μm,初步推測(cè)為真菌，則其特征中，最能說(shuō)明SM01是真菌的是有細(xì)胞核，且有分生孢子．SM01還一定具有的結(jié)構(gòu)有（多選）．
A．細(xì)胞膜 B．核糖體 C．?dāng)M核 D．莢膜
（2）表中培養(yǎng)液pH均為6.0，若對(duì)SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進(jìn)行測(cè)定，則應(yīng)選用表中的培養(yǎng)液，針對(duì)不選用的其他培養(yǎng)液，分別說(shuō)明原因：
①缺少，SM01不能很好生長(zhǎng)
②具有，會(huì)影響對(duì)SM01自身產(chǎn)生的酶活力的測(cè)定結(jié)果
③缺乏，會(huì)影響SM01的生長(zhǎng)，也無(wú)法對(duì)阿拉伯膠酶活力進(jìn)行測(cè)定．
表 試驗(yàn)用培養(yǎng)液配方培養(yǎng)液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發(fā)布：2025/1/2 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.5 -
3．為了防治大氣污染，煙氣脫硫是環(huán)保領(lǐng)域迫切需要解決的問(wèn)題．研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細(xì)菌，并了解其生長(zhǎng)規(guī)律，進(jìn)行了如下操作．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）采樣與細(xì)菌的篩選：在某熱電廠煙囪周圍區(qū)域要盡量做到采集土樣．為確保能夠從樣品中分離到所需要的煙氣脫硫細(xì)菌，可以通過(guò)增加脫硫菌的濃度．
（2）馴化脫硫細(xì)菌：將篩選出的脫硫細(xì)菌接種于有少量無(wú)菌水的三角瓶中，邊攪拌邊持續(xù)通入SO2氣體幾分鐘，然后接種到培養(yǎng)基上，待長(zhǎng)出菌落后再重復(fù)上述步驟，并逐步延長(zhǎng)通SO2的時(shí)間，同時(shí)逐步降低培養(yǎng)基的pH．此操作的目的是分離出的脫硫細(xì)菌．
（3）培養(yǎng)與觀察：一般來(lái)說(shuō)，在一定的培養(yǎng)條件下（相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時(shí)間），馴化后的脫硫細(xì)菌表現(xiàn)出穩(wěn)定的特征．用高倍顯微鏡（填“可以”或“不可以”）觀察到脫硫細(xì)菌的核糖體．
（4）探究生長(zhǎng)規(guī)律：在計(jì)數(shù)時(shí)，計(jì)數(shù)方法有稀釋涂布平板法和直接計(jì)數(shù)法．在用稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落來(lái)源于樣品稀釋液中的；通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌，通常推測(cè)統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目．發(fā)布：2025/1/1 8:0:2組卷：6引用：2難度：0.5
相關(guān)試卷