β-胡蘿卜素可在人體內(nèi)轉(zhuǎn)化為維生素A。普通水稻胚乳細胞中不含β-胡蘿卜素，科研人員將psy基因（八氫番茄紅素合成酶基因）和crtI基因（胡蘿卜素脫飽和酶基因）轉(zhuǎn)入水稻，培育出胚乳中富含β-胡蘿卜素的水稻。為此研究者構(gòu)建了含如圖所示重組T-DNA片段的重組Ti質(zhì)粒。

（1）據(jù)圖分析，構(gòu)建重組T-DNA片段時，科研人員首先要用限制酶

I-SecⅠ

I-SecⅠ

和DNA連接酶處理，將psy基因和crtI基因接入，再用

限制酶kpnⅠ和DNA連接酶

限制酶kpnⅠ和DNA連接酶

處理，將潮霉素抗性基因接入。將該T-DNA片段導入水稻細胞，獲得T₀代植株。提取T₀代的總DNA，通過PCR技術(shù)檢測

目的基因是否導入受體細胞

目的基因是否導入受體細胞

。
（2）已知潮霉素對原核細胞和真核細胞的生長都有抑制作用，據(jù)此分析重組T-DNA片段中接入潮霉素抗性基因的作用是

篩選轉(zhuǎn)入重組T-DNA的農(nóng)桿菌和含重組T-DNA的水稻

篩選轉(zhuǎn)入重組T-DNA的農(nóng)桿菌和含重組T-DNA的水稻

。
（3）重組T-DNA片段中有兩種啟動子，推測

啟動子2

啟動子2

（填“啟動子1”或“啟動子2”）是水稻種子的胚乳細胞特異性表達的啟動子，這樣設計的目的是

使psy基因和crtⅠ基因在胚乳中特異性表達，使其胚乳中含有β-胡蘿卜素

使psy基因和crtⅠ基因在胚乳中特異性表達，使其胚乳中含有β-胡蘿卜素

。
（4）據(jù)圖分析，潮霉素抗性基因和psy基因轉(zhuǎn)錄時所使用的重組Ti質(zhì)粒模板鏈

不同

不同

（選填“相同”或“不同”），判斷依據(jù)是

潮霉素抗性基因和psy基因轉(zhuǎn)錄方向不同，轉(zhuǎn)錄時，均以基因的一條鏈為模板且轉(zhuǎn)錄時，RNA延伸方向均為5′→3′

潮霉素抗性基因和psy基因轉(zhuǎn)錄方向不同，轉(zhuǎn)錄時，均以基因的一條鏈為模板且轉(zhuǎn)錄時，RNA延伸方向均為5′→3′

。
（5）取T₀代水稻自交獲得種子，種植后獲得T₁代植株630株，表現(xiàn)出潮霉素抗性的植株有470株，據(jù)此可知轉(zhuǎn)基因水稻與非轉(zhuǎn)基因水稻的比約為

3：1

3：1

，此性狀的遺傳遵循

基因分離

基因分離

定律。
（6）綜上可知，科研人員在

分子水平和個體

分子水平和個體

水平上對轉(zhuǎn)基因水稻進行檢測與鑒定。